[发明专利]一种快速、低成本从鸡血中分离PCR模板的方法在审
申请号: | 201811326872.1 | 申请日: | 2018-11-08 |
公开(公告)号: | CN109402112A | 公开(公告)日: | 2019-03-01 |
发明(设计)人: | 龚炎长;骆薇;袁杨杨 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鸡血 低成本 灭菌水 枪头 螯合型离子交换树脂 细胞核 分离血细胞 分子检测 血样 快速DNA 放入 干热 混匀 尖部 剪去 抗凝 裂解 水浴 摇匀 加热 沉淀 耗时 冷冻 新鲜 检测 | ||
1.一种快速、低成本从鸡血中分离PCR模板的方法,其步骤是:
A、从血样中分离血细胞核:向1.5mL EP管中加入10-20μl新鲜、冷冻的抗凝鸡血样品,4000rpm离心1分钟去上清;向管中加入500μl灭菌水,静置一分钟,9500rpm离心2-4分钟,弃上清;
B、裂解细胞核:使用剪去枪头尖部的枪头向沉淀中加入200μl灭菌水摇匀的3-4%螯合型离子交换树脂溶液,混匀后,55-57℃水浴30分钟,再放入干热仪,100℃加热8分钟;
C、PCR模板分离:9500rpm离心2分钟,取上清作为PCR模板。
2.根据权利要求1所述的一种快速、低成本从鸡血中分离PCR模板的方,其特征在于:所述的PCR扩增反应的引物及扩增条件:
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