[发明专利]一种高密度遗传连锁图谱的快速构建方法

摘要

本发明提供一种快速、低成本的构建高密度遗传连锁图谱的方法，其步骤包括亲本杂交F1代种子收集、种子子叶中微量DNA多重置换扩增、简化基因组测序以及基因分型，最后基于拟测交策略使用遗传连锁图谱构建软件即可获得植物的高密度遗传连锁图谱。本发明的优点在于直接使用杂交F1代种子即可用于构建高密度遗传连锁图谱，耗时短，成本低；一方面克服了杨梅栽培品种间杂交种子萌发困难、生长发育耗时长的障碍，而且可以较低成本构建较高密度的遗传图谱。该方法为应用多年生林木作为亲本杂交以及子代种子较难萌发的群体进行遗传连锁图谱构建提供了新的思路和方法，加速了此类植物的高密度遗传图谱构建进程。

主权项

1.一种高密度遗传连锁图谱的快速构建方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：A、栽培品种杂交授粉：始花期前将母本的雌花花序隔离，父本的花粉授到母本的雌花上继续隔离，待杂交果实成熟后收集杂交F1种子；B、杂交F1种子处理与样品收集：杂交F1种子破壁后取种子子叶部分作为样品；C、提取与纯化子叶中的微量DNA；D、多重置换扩增方法处理子叶中的微量DNA，获得多个扩增后的DNA样品；E、真假杂种鉴定：对扩增后的DNA样品进行PCR扩增，PCR扩增结果在遗传分析仪上鉴定其片段大小，最后对父、母本及杂交群体进行对比分析，若后代群体扩增出条带大小与父母本完全一致即为真杂种，扩增出其他片段大小的后代均为假杂种，直接剔除；F、通过鉴定后的真杂种DNA进行测序，绘制高密度遗传连锁图谱。