[发明专利]一种曼氏无针乌贼自噬水平的荧光定量检测方法和引物有效
申请号: | 201811236678.4 | 申请日: | 2018-10-23 |
公开(公告)号: | CN109402267B | 公开(公告)日: | 2022-03-18 |
发明(设计)人: | 柳意樊 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 316000 浙江省舟山市普陀海*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供一种曼氏无针乌贼自噬水平的荧光定量检测方法和引物,属于分子生物学技术领域,检测自噬水平选用的基因包括LC3和BECN1;LC3扩增引物如SEQ ID NO:1、2、3和4所示。荧光定量检测方法为实时荧光定量PCR方法,具体包括如下步骤:提取曼氏无针乌贼基因组总RNA,反转录合成cDNA;利用引物对cDNA进行实时荧光定量PCR,检测。本发明引物能够反映细胞的自噬活性,可以简便、定量地检测细胞内自噬水平,进而来监测环境及胁迫因子对曼氏无针乌贼自噬水平的调节影响;本发明检测方法能保证LC3和BECN1的表达量,能真实反映细胞的自噬活性,灵敏度和准确性高。 | ||
搜索关键词: | 一种 曼氏无针 乌贼 水平 荧光 定量 检测 方法 引物 | ||
【主权项】:
1.一种曼氏无针乌贼自噬水平的荧光定量检测方法用引物,其特征在于:所述检测自噬水平选用的基因包括LC3和BECN1;所述LC3扩增用引物为:5’‑CGCCGTTTACAGTTGCATCC‑3’;5’‑GCCGTCGTCATCTTTTTCCC‑3’;所述BECN1扩增用引物为:5’‑ATGCACAAAGCCAACTGGAAA‑3’;5’‑TGACCCCAAGCAGCATTGAT‑3’。
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