[发明专利]一种活病毒快速检测方法及其应用在审
| 申请号： | 201811148034.X | 申请日： | 2018-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN109338013A | 公开（公告）日： | 2019-02-15 |
| 发明（设计）人： | 徐丽明;魏慧慧;段晓杰;张羽;陈亮;邵安良;魏利娜;张乐;李天任;王玉梅 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 李海恬 |
| 地址： | 102629 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种活病毒快速检测方法及其应用，属于生物检测技术领域。该检测方法，包括以下步骤：转染：将待测病毒接种于预先在细胞培养板培养得到的单层宿主细胞，转染培养；检测：在待测病毒接种后进入宿主细胞但未扩增的收样时间点收样，清洗除去宿主细胞外病毒，随后提取宿主细胞内病毒DNA进行PCR检测，得到待测病毒中活病毒含量。上述检测方法该方法可以有效地检测病毒灭活工艺后的残留活病毒。其定量限为104copies·μL‑1(约相当于2lgs)，检测限为103copies·μL‑1(约相当于‑1lg)。可以检出PRV感染滴度的最低检测限为‑1lg，比传统CPE法(‑0.5lg)灵敏度高，可避免人为主观因素对结果判断的影响，且节省时间和实验成本。 | ||
| 搜索关键词： | 宿主细胞 活病毒 检测 病毒接种 快速检测 转染 病毒 生物检测技术 细胞培养板 病毒灭活 感染滴度 结果判断 实验成本 主观因素 病毒DNA 灵敏度 有效地 单层 检出 扩增 应用 清洗 残留 | ||
【主权项】：
1.一种活病毒快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：转染：将包括有死病毒和/或活病毒的待测病毒样品接种于预先在细胞培养板培养得到的单层宿主细胞，转染培养；检测：待测病毒接种后，在其中活病毒进入宿主细胞但未扩增的收样时间点收样，清洗除去宿主细胞外死病毒，随后提取宿主细胞内活病毒DNA进行病毒核酸PCR检测，得到待测病毒中活病毒含量。
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