[发明专利]一种检测β-淀粉样蛋白的基于THMS的电化学发光适体传感器及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种检测β‑淀粉样蛋白的基于THMS的电化学发光适体传感器及其制备方法和应用，该传感器制备包括如下步骤：(1)适体捕获探针、信号探针的设计与合成：(2)THMS电化学发光适体传感器的构建与优化，最终构建基于THMS的电化学发光适体传感器。本发明制备的基于THMS的电化学发光适体传感器具有高灵敏度、高选择性、高稳定性，可以定量检测Aβ蛋白，并且检测的线性范围宽、检出限低。本发明首次将适体单独作为Aβ的识别元件，并结合THMS特殊构型以构建ECL传感器，其完全保留适体的特有结构和活性，具有高灵敏度和稳定性，为Aβ蛋白的分析检测提供一种新思路，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种检测β‑淀粉样蛋白的基于THMS的电化学发光适体传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)适体捕获探针、信号探针的设计与合成：人工设计合成适体捕获探针：aptamer；信号探针：完全互补ssDNA；(2)THMS电化学发光适体传感器的构建与优化：①aptamer/Au电极的制备将巯基修饰的aptamer滴加在金电极表面，避光培育，再滴加巯基己醇，放置备用；②RuCu@AuNPs‑ssDNA的制备低温法制备Ru(bpy)32+/铜纳米颗粒共掺杂金的合金核壳光学复合纳米颗粒RuCu@AuNPs；将巯基修饰的ssDNA溶解于RuCu@AuNPs的水溶液中，反应后形成RuCu@AuNPs‑ssDNA，离心洗涤，分散后保存；③THMS的形成将aptamer/Au电极与RuCu@AuNPs‑ssDNA温育，电极经Tris‑HCl溶液清洗，在电极表面形成THMS；④aptamer‑Aβ的形成THMS修饰电极与检测蛋白Aβ温育，电极经Tris‑HCl溶液清洗，此电极记作aptamer‑Aβ电极；⑤ECL检测将THMS电极、aptamer‑Aβ电极分别作为工作电极，Ag/AgCl电极作为参比电极，Pt丝电极作为对电极，构成三电极体系，所述三电极体系构建基于THMS的电化学发光适体传感器，分别进行两次ECL测定，前后两次ECL信号的差值定量Aβ。