[发明专利]一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法在审
| 申请号： | 201811056559.0 | 申请日： | 2018-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN109136145A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 徐双贵;胡培;卢文轩 | 申请（专利权）人： | 安徽万士生物制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 冯子玲 |
| 地址： | 230000 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法，涉及微生物技术领域。本发明包括步骤一：制备样品液；步骤二：稀释样品液；步骤三：分离培养；步骤四：制备纯化培养基；步骤五：纯化培养。本发明通过分离培养提高了菌种的纯化，解决了现有分离出的双歧杆菌活菌量较低的问题；通过对纯化培养基进行优化，有效的缩短了培养时间，解决了现有培养时间较长成本高，效率较低的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 双歧杆菌 分离培养 培养基 样品液 兔粪 制备 微生物技术领域 纯化培养 活菌量 稀释 菌种 优化 | ||
【主权项】：
1.一种从兔粪中分离双歧杆菌及其纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：制备样品液；取新鲜兔粪置于蛋白胨缓冲液中，充分搅拌均匀，一次离心处理后收集上层浊液；向上浊液加入适量蛋白胨缓冲液，再次离心处理后收集上层浊液，即为样品液；步骤二：稀释样品液；取一定量样品液以十倍稀释法使用蛋白胨缓冲液进行稀释，稀释梯度为10‑1至10‑9；步骤三：分离培养；分别取一定量的稀释梯度为10‑4至10‑9的稀释样品液置于培养基平板上，每个稀释梯度的稀释样品液做2至3个平行样；厌氧条件下培养45‑50小时后在移至好氧条件下培养5‑7小时；步骤四：制备纯化培养基；对改良MRS培养基进行氮源和碳源优化；步骤五：纯化培养；根据双歧杆菌性状对步骤三中的培养的菌落进行挑选，将挑选的菌种接种至步骤四制备的纯化培养液中进行纯化培养。
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