[发明专利]一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法在审
| 申请号： | 201811040100.1 | 申请日： | 2018-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN109112102A | 公开（公告）日： | 2019-01-01 |
| 发明（设计）人： | 马亚东;黄宗堂;曹娜 | 申请（专利权）人： | 丰泽康生物医药（深圳）有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12N5/0775 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 518001 广东省深圳市罗湖区东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法，属于细胞生物学技术和再生医学领域，取外周血多潜能间充质基质细胞进行原代培养，得到第三代细胞；将第三代传代外周血多潜能间充质基质细胞与人关节软骨细胞按共在诱导培养基中培养，本发明采用的一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法，外周血多潜能干细胞和软骨细胞共培养，两种细胞相互促进增殖和分化，可减少软骨细胞增殖传代次数并节省软骨细胞数量，提高了分化率，对建立种子细胞源是提供一种高效的方法，也为扩大软骨组织工程的细胞源提供了一种新的医学实验根据。 | ||
| 搜索关键词： | 外周血 软骨细胞 多潜能细胞 分化 间充质基质细胞 传代 第三代 细胞 潜能 细胞生物学技术 多潜能干细胞 软骨细胞增殖 软骨组织工程 人关节软骨 诱导培养基 医学实验 原代培养 再生医学 种子细胞 分化率 细胞源 增殖 | ||
【主权项】：
1.一种提高外周血多潜能细胞向软骨细胞分化的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)取外周血多潜能间充质基质细胞进行原代培养，原代培养采用的培养基，包括，人类间充质干细胞无血清培养基、胎牛血清、氨苄青霉素、链霉素、成纤维细胞生长因子、阿米卡星，待细胞贴壁后，用胰蛋白酶消化离心，得到原代外周血多潜能间充质基质细胞；(2)外周血多潜能间充质基质细胞用胰蛋白酶消化处理后，得到的原代细胞置于新的培养基中进行传代培养，待细胞长至80％～90％融合时，用胰蛋白酶消化处理，然后离心分离，得到第二代细胞；(3)第二代细胞置于新的培养基中进行传代培养，待细胞长至80％～90％融合时，用胰蛋白酶消化处理，然后离心分离得到第三代传代外周血多潜能间充质基质细胞；(4)将所述的第三代传代外周血多潜能间充质基质细胞与人关节软骨细胞共在诱导培养基中培养，诱导分化为软骨细胞。
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