[发明专利]人源趋化因子MIP-1α或SDF-1α在真核细胞中的重组表达方法在审
| 申请号： | 201811034129.9 | 申请日： | 2018-09-05 |
| 公开（公告）号： | CN109295094A | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 周志诚;柴梦莹 | 申请（专利权）人： | 柴梦莹 |
| 主分类号： | C12N15/86 | 分类号： | C12N15/86;C12N15/12 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 吴莎 |
| 地址： | 510240 广东省广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人源趋化因子MIP‑1α或SDF‑1α在真核细胞中的重组表达方法，该方法利用载体质粒pSFV2作为携带编码MIP‑1α或SDF‑1α的外源基因的载体，与包装质粒pHelper转染真核细胞后，使得外源基因表达的目的蛋白能够被修饰而具有生物活性，且采用该方法表达纯化出的目的蛋白纯度高、收率大、生理和药理活性强。 | ||
| 搜索关键词： | 目的蛋白 趋化因子 真核细胞 重组表达 人源 外源基因表达 转染真核细胞 包装质粒 生物活性 外源基因 药理活性 载体质粒 收率 修饰 携带 | ||
【主权项】：
1.一种人源趋化因子MIP‑1α或SDF‑1α在真核细胞中的重组表达方法，其特征在于，其包括：将编码MIP‑1α或SDF‑1α的外源基因连接至载体质粒，再将所述载体质粒和包装质粒转染包装细胞，培养转染后的所述包装细胞，得到病毒载体，所述载体质粒为pSFV2，所述包装质粒为pHelper，所述外源基因的终止子后还连接有特异性标签，所述特异性标签用于编码至少一个特异性标签双连续重复多肽；将所述病毒载体转染宿主细胞，经培养后，收集上清液，所述宿主细胞为真核细胞；以及离心、纯化所述上清液，得到所述外源基因表达的具有生物活性的目的蛋白。
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