[发明专利]一种重组变构胶原酶的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201810851432.1 | 申请日： | 2018-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN108949730B | 公开（公告）日： | 2020-05-12 |
| 发明（设计）人： | 仓勇;张震;杜刚;陈福鼎 | 申请（专利权）人： | 杭州观苏生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/52 | 分类号： | C12N9/52;A61K38/48;A61P3/04;A61P17/02;A61P35/00;A61K8/66;A61Q19/00;A23L33/195 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知识产权代理有限公司 11340 | 代理人： | 李振文 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市滨江区长河街道滨安路11*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及重组变构胶原酶的纯化方法及其应用，公开了一种制备高纯度单一突变体胶原蛋白酶ColH的方法和所获得的产品。所述制备高纯度单一突变体胶原蛋白酶ColH的方法包括采用特定宿主菌BL21(DE3)表达E451D单点突变ColH变构胶原酶蛋白，经低温菌种发酵诱导后，提高目的蛋白产量。通过五步纯化：Capto Phenyl HS疏水层析；Capto Q阴离子交换层析；CaptoOctyl疏水层析；Phenyl HP疏水层析；Source 15Q阴离子交换层析后，获得了纯度98％以上的目的蛋白。生物学实验结果表明，此工艺生产的突变胶原蛋白酶纯度高，稳定性好，与之前的胶原蛋白酶商品相比具有明显的优势，酶比活显著提高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 胶原酶 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种组合物，包含纯度98％以上重组变构胶原酶，其中所述重组变构胶原酶为溶组织梭菌中表达胶原蛋白酶ColH的451位点谷氨酸被突变成天冬氨酸，所述重组变构胶原酶的序列如SEQ ID NO：1所示。
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