[发明专利]用于POCT荧光RT-PCR体系的单体系酶扩增组合物的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201810794915.2 | 申请日： | 2018-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN108866156A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 孙明;乔明明;陈西钊;田克恭;吴培星;李文姝;王静;陈曦 | 申请（专利权）人： | 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人： | 向群 |
| 地址： | 100094 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明“用于POCT荧光RT‑PCR体系的单体系酶扩增组合物的制备方法及其应用”属于试剂盒检测技术领域。所述制备方法包括：按如下配方配制反应液：pH值8.3～8.7的Tris‑HCl反应缓冲液20～50mM、MgCl21～3mM、KCl 40～50mM、dNTPs 50～200μM、dUTP 100～400μM、反转录酶100～200U/μl、Taq酶0.8～2.8U/μl、RNA酶抑制剂10.5U/T～12.5U/T、引物0.1～1μM、探针0.01～0.2μM、终浓度为1～20Mm或体积比0.05％～10％的反应增强剂、其余为无菌无核酸酶水。 | ||
| 搜索关键词： | 制备 扩增组合物 反应缓冲液 反应增强剂 试剂盒检测 无核酸酶水 荧光RT-PCR 反转录酶 体积比 荧光 探针 无菌 引物 配制 应用 配方 | ||
【主权项】：
1.用于POCT荧光RT‑PCR体系的单体系酶扩增组合物的制备方法，其特征在于，包括：(1)针对目标序列设计并合成特异性的引物和探针；(2)按如下配方配制反应液：pH值8.3～8.7的Tris‑HCl反应缓冲液20～50mM、MgCl2 1～3mM、KCl 40～50mM、dNTPs 50～200μM、dUTP 100～400μM、反转录酶100～200U/μl、Taq酶0.8～2.8U/μl、RNA酶抑制剂10.5U/T～12.5U/T、引物0.1～1μM、探针0.01～0.2μM、终浓度为1～20Mm或体积比0.05％～10％的反应增强剂、其余为无菌无核酸酶水；(3)将上述反应液按份分装，每一份即所述单体系酶扩增组合物。
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