[发明专利]一种猪细小病毒的增殖方法

摘要

本发明涉及一种猪细小病毒的增殖方法，将猪细小病毒接种于ST细胞，进行细胞培养至90%~100%细胞出现病变；反复冻融使宿主细胞破碎，离心去除细胞碎片，收集上清液；将上清液、牛血清白蛋白、甘露醇和/或甘氨酸、L‑精氨酸混匀，然后进行冷冻干燥；其中，牛血清白蛋白（BSA）占混合液总质量的1~2%，甘露醇和/或甘氨酸占混合液总质量的1~3%，L‑精氨酸占混合液总质量的0.5~3%。本发明提供的猪细小病毒的增殖方法，工艺简便、传代次数少，在病毒去除/灭活验证具有广泛应用前景。增殖后的病毒滴度不低于106.0 TCID50/0.1ml，显著高于现行技术培养的猪细小病毒的滴度。

主权项

1.一种猪细小病毒的增殖方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）将猪细小病毒接种于ST细胞，进行细胞培养至90%~100%细胞出现病变；（2）反复冻融使宿主细胞破碎，离心去除细胞碎片，收集上清液；（3）将所述的上清液、牛血清白蛋白、甘露醇和/或甘氨酸、L‑精氨酸混匀得到混合液，然后将所述的混合液进行冷冻干燥；其中，所述的牛血清白蛋白占所述的混合液总质量的1~2%，所述的甘露醇和/或甘氨酸占所述的混合液总质量的1~3%，所述的L‑精氨酸占所述的混合液总质量的0.5~3%。