[发明专利]一种茶油脂肪酸指标的预测方法

摘要

本发明公开了一种茶油脂肪酸含量的预测方法，采用本发明的测定方法：1HNMR结合PLS可用来快速预测茶油脂肪酸含量，包括C16:0、C18:0、C18:1、C18:2、C18:3、TFA、SFA、USFA、MUFA、以及PUFA。

主权项

1.一种茶油脂肪酸指标的预测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)脂肪酸含量的测定：脂肪酸甲酯化：准确称取10mg样品于离心管中，分别加入10μL C21:0内标液，2mL正庚烷和0.1mL 2mol/L氢氧化钾‑甲醇溶液，震摇30s，离心，取1mL上清液置于气相瓶待测；色谱条件：采用CP‑Sil 88型毛细管色谱柱：100m×0.25mm×0.39mm，0.20μm，Varian Inc,USA，FID检测器，进样量为1μL，高纯氢气为载气，进样口温度250℃，检测器温度250℃，恒流模式，分流比为10:1，氢气流量为30mL/min，空气流量为300mL/min，尾吹气流量为20mL/min，载气线速为26cm/s；升温程序为：初温60℃，保持5min，以11.5℃/min升至170℃，保持25min；再以5℃/min的速率升至200℃，保持5min；最后以2℃/min升温至215℃，保持20min；(2)1H NMR测定：A:取200μL混合油样与800μL CDCl3混合，涡旋半分钟，室温下静至5min,取600μL转移至5mm核磁管中进行核磁实验，总计66个样品；B:测定条件控制在：温度298K；600MHz核磁共振仪的频率600.38MHz；谱宽13ppm；每个图谱扫描32次；空扫4次；脉冲序列zg30；以四甲基硅烷(TMS,δ＝0)为内标；C:数据处理：将测得的样品自由衰减信号导入MestReNova软件中进行傅里叶变换，并进行相位校正和基线校正，1H NMR谱图手动积分，将酰基链上α‑亚甲基氢，‑OCO‑CH2‑，信号9，2.40‑2.20ppm的积分面积标准化为1000，其它信号峰面积以此为参考标准，最终得到16个积分片段，获得的数据矩阵导入SIMCA13软件，建立PLS模型，将所采集的样本分为两大类，随机取2/3的样品划分为训练集，用于建立PLS模型；剩余1/3的样品作为预测集，用于检验PLS模型；采用NO、UV、Par和Ctr等方法对原始数据进行预处理，基于最低RMSECV值选取主因子数，建立PLS模型，通过R2、RMSEE以及RMSEP来评价模型的预测能力。