[发明专利]一种植物叶片衰老指数的测定方法在审
申请号: | 201810487658.8 | 申请日: | 2018-05-21 |
公开(公告)号: | CN110511979A | 公开(公告)日: | 2019-11-29 |
发明(设计)人: | 黄升谋 | 申请(专利权)人: | 湖北文理学院 |
主分类号: | C12Q1/6816 | 分类号: | C12Q1/6816;C12Q1/6806 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 441053 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供一种植物叶片衰老指数的测定方法。该方法如下:首先提取植物叶片的总RNA,以甲醛‑琼脂糖凝胶电泳法对其进行电泳,凝胶成像系统照相,分析总RNA的提取质量。用紫外可见分光光度计测定其含量和纯度。然后分离纯化mRNA,用紫外可见分光光度计测定其含量和纯度。用mRNA含量/总RNA含量表示叶片衰老指数。该方法灵敏、准确,反映了叶片衰老的本质。 | ||
搜索关键词: | 叶片衰老 总RNA 紫外可见分光光度计 琼脂糖凝胶电泳法 凝胶成像系统 电泳 分离纯化 提取植物 种植物 叶片 甲醛 灵敏 照相 分析 | ||
【主权项】:
1.把总 RNA含量用于作为叶片衰老的指数的测定,其步骤如下:/n1、取100mg样品放入液氮中研磨并匀浆;/n2、加入450ul的胍基硫氢酸缓冲液,并涡旋振荡,使核酸酶变性失活,以得到完整的核酸;/n3、把样品液移入 QIAshredder旋转柱中,在20℃下以14000rpm离心2分钟;/n4、上清液中加入225ul的乙醇,提供硅胶膜束缚核酸的条件;/n5、把样品加入到含有硅胶膜的RNeasy mini 旋转柱中,总RNA吸附到硅胶膜上,用缓冲液洗脱去各种污染物,用无核糖核酸酶的水把总RNA从RNeasy mini 旋转柱中洗脱下来;/n6、以甲醛-琼脂糖凝胶电泳法对其进行电泳,凝胶成像系统照相,分析总RNA的提取质量;/n7、用紫外可见分光光度计测定其含量和纯度。/n
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