[发明专利]一种生物抑制剂在柑橘釆后防腐保鲜中的应用

摘要

本发明属于水果釆后防腐保鲜领域，具体涉及一种生物抑制剂在柑橘釆后防腐保鲜中的应用。步骤为：(1)用次氯酸钠溶液消毒柑橘果实，清水洗净晾干；(2)对果实造伤，向伤口注射适量的的氨水，之后再注射20.1‐10×10⁷CFU/mL意大利青霉(Penicillium‐italicum)孢子悬液，培养后剥离有红色物质的果皮组织，液氮研磨，冷冻保存；(3)向样品组织粉末中加入甲醇，用240V 40kHz的超声浸提，离心，收集上清，残渣继续提取1‐3次，合并提取液，旋蒸干燥后用甲醇‑水溶液复溶；(4)梯度浓度萃取复溶后提取液；(5)过柱层析醇溶液‐提取液，洗脱液旋蒸后冷冻干燥。本发明可在釆后果蔬保鲜中应用。

主权项

1.一种生物抑制剂在柑橘采后防腐保鲜中的应用，其特征包括以下步骤：/n(1)将采后的柑橘果实用0.5-5g/100mL浓度的次氯酸钠水溶液清洗后，再用清水清洗干净，晾干后备用；/n(2)用移液枪枪头对果实进行造伤，然后向伤口中注射20-30μL体积浓度为0.5-5％(v/v)的氨水水溶液，20-30h后，再注射20-30μL的浓度为0.1-10×10⁷CFU/mL的意大利青霉菌(Penicillium-italicum)孢子悬浮液，将处理后的果实置于生化培养箱中，于25-30℃下培养4-5天，将带有红色物质的果皮组织剥离，用液氮研磨，冷冻保存备用，得到冷冻果皮样品组织粉末；/n(3)向冷冻果皮样品组织粉末中加入分析纯甲醇，用240V 40kHz的超声浸提20min，4-10℃低温下离心，收集上清液，残渣继续按同样条件提取1-3次，合并三次提取液，旋蒸干燥后用体积浓度为5-20％(v/v)的甲醇-水溶液复溶；/n(4)将复溶后的提取液进行逐步萃取：先用分析纯石油醚与复溶后的提取液按体积比为1:1进行萃取，保留甲醇水相，再用分析纯二氯甲烷与甲醇水相按体积比为1:1萃取，保留二氯甲烷相，萃取后将有机溶剂蒸干，再用分析纯甲醇溶解，得到甲醇溶液-提取液；/n(5)将步骤(4)得到的甲醇溶液-提取液进行柱层析，过C-18柱，洗脱剂为甲醇-水溶液，依次用体积浓度为20％、30％、40％、50％、60％和80％的梯度洗脱液洗脱，收集体积浓度为40-60％(v/v)的洗脱液，将所得的洗脱液旋蒸后冷冻干燥。/n