[发明专利]一种生物抑制剂在柑橘釆后防腐保鲜中的应用

说明书

本发明属于水果釆后防腐保鲜领域，具体涉及一种生物抑制剂在柑橘釆后防腐保鲜中的应用。步骤为：(1)用次氯酸钠溶液消毒柑橘果实，清水洗净晾干；(2)对果实造伤，向伤口注射适量的的氨水，之后再注射20.1‐10×10⁷CFU/mL意大利青霉(Penicillium‐italicum)孢子悬液，培养后剥离有红色物质的果皮组织，液氮研磨，冷冻保存；(3)向样品组织粉末中加入甲醇，用240V 40kHz的超声浸提，离心，收集上清，残渣继续提取1‐3次，合并提取液，旋蒸干燥后用甲醇‑水溶液复溶；(4)梯度浓度萃取复溶后提取液；(5)过柱层析醇溶液‐提取液，洗脱液旋蒸后冷冻干燥。本发明可在釆后果蔬保鲜中应用。

技术领域

本发明属于水果采后防腐保鲜技术领域，具体涉及一种生物抑制剂在柑橘釆后防腐保鲜中的应用。

背景技术

我国是柑橘原产地和生产大国，品种多，资源丰富，柑橘果实营养丰富，深受消费者欢迎。但柑橘产地偏远，同时果实成熟期集中，而且柑橘采后极易感染病原菌而腐烂变质，品质降低，由意大利青霉和指状青霉侵染柑橘引起的病害较为多见。

柑橘青霉病的病原菌为意大利青霉(Penicillium italicum)，分生孢子梗无色，顶端有2-5个分枝，呈扫帚状，而绿霉病的病原为指状青霉(Penicillium digitatum)，分生孢子梗无色，顶端分支较少。柑桔青、绿霉病的症状基本相同，受害果实初期为水渍状软腐，病部组织湿润柔软，用手指按压病部果皮容易破裂。2-3日后病部产生白色霉状物，随后在白色霉状物中部产生青色或蓝绿色粉状孢子，之后病部不断扩大，导致全果腐烂，腐烂部分深入果肉内部。但两病的症状也有些不同，青霉病产生的粉状孢子呈青色，白色霉状物很窄，腐烂的速度较慢；绿霉病产生的粉状孢子呈蓝绿色，白色霉状物带较宽，约8-18毫米，腐烂速度较快。绿霉病菌对温度的要求略高于青霉菌，所以柑橘在贮藏初期多发生青霉病，到贮藏后期，温度增高，绿霉病则发生较多。

目前，柑橘采后病害防治技术主要是通过物理方法、化学方法、生物方法以及三者结合的综合防治措施。物理方法但成本高，且效果不如化学方法，化学防治方法是现阶段最为常见且效果较为显著的采后防治方法，且成本低，价格低廉，但长期使用也会带来诸如生态破坏、毒性污染、病菌抗药性等问题。植物诱导抗病性具有持效期长、广谱抗病、抗病性的表达时间和空间可以控制等优点，同时，大部分诱导物对环境无污染。因此，植物诱导抗病性这种新兴的生物防治方式成为了研究热点。

本发明通过局部诱导抗病性建立一种新的意大利青霉抑制剂的制备与应用方法，本发明能够为柑橘青霉病的防治提供新的思路，也为后续其抑菌机理的研究及在柑橘贮藏保鲜上的应用提供指导。

发明内容

本发明的目的在于克服现有柑橘采后防腐保鲜技术存在的缺陷，提供一种生物抑制剂在柑橘釆后防腐保鲜中的应用。本发明具体涉及生物抑制剂的制备及其在柑橘防腐保鲜中的应用。本发明为绿色提取技术，所述的生物抑制剂的应用可避免目前使用化学杀菌剂的缺陷，提供一种天然、绿色的水果保鲜技术。

本发明的技术方案如下所述：

申请人提供了一种柑橘采后防腐保鲜中的生物抑制剂的制备方法，所述的方法包括以下步骤：

(1)将采后的柑橘果实(例如脐橙，但不限于此品种)用0.5-5g/100mL浓度的次氯酸钠水溶液清洗后，再用清水清洗干净，晾干后备用；

(2)用移液枪枪头对果实进行造伤，然后向伤口中注射20-30μL体积浓度为0.5-5％(v/v)的氨水水溶液，20-30h后，再注射20-30μL，浓度为0.1-10×10⁷CFU/mL的意大利青霉菌(Penicillium-italicum)孢子悬浮液，将处理后的果实置于生化培养箱中，于25-30℃下培养4-5天，将带有红色物质的果皮组织剥离，用液氮研磨，冷冻保存备用，得到冷冻果皮样品组织粉末；