[发明专利]GSK-3β抑制剂在体外诱导人体Breg细胞的用途及分离和诱导Breg细胞的方法有效
| 申请号： | 201810464290.3 | 申请日： | 2018-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN108753714B | 公开（公告）日： | 2019-07-30 |
| 发明（设计）人： | 夏永祥;陆云杰;吕凌;高骥;周浩明;饶建华 | 申请（专利权）人： | 夏永祥 |
| 主分类号： | C12N5/0781 | 分类号： | C12N5/0781 |
| 代理公司： | 南京科知维创知识产权代理有限责任公司 32270 | 代理人： | 杜依民 |
| 地址： | 210000 江苏省南京*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种GSK‑3β抑制剂在体外诱导人体Breg细胞的用途，以及利用GSK‑3β抑制剂体外诱导人体Breg细胞的方法，采用GSK‑3β抑制剂在体外诱导人体Breg细胞，以及GSK‑3β抑制剂诱导普通B细胞向Breg细胞转化的效果中，采用GSK‑3β抑制剂诱导Breg细胞诱导纯度高，诱导后Breg炎性细胞因子分泌减少，诱导后Breg抑制功能增强。采用本发明利用GSK‑3β抑制剂体外诱导人体Breg细胞的方法，操作简单，耗时短，纯度高、细胞活性损伤小，转化效率高，细胞活性高，来源广，污染可能性小，能够弥补目前Breg基础和临床研究上数量不足，为Breg细胞的进一步功能研究提供了一种新的实验方法。 | ||
| 搜索关键词： | 抑制剂 体外诱导 细胞 诱导 细胞活性 炎性细胞因子 污染可能性 功能研究 功能增强 临床研究 细胞诱导 细胞转化 转化效率 分泌 耗时 损伤 | ||
【主权项】：
1.GSK‑3β抑制剂在体外诱导普通B细胞向CD19+CD24++CD27+Breg细胞亚群转化的用途。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于夏永祥，未经夏永祥许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810464290.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种外周血B细胞系的构建方法及其应用-201910650302.6
- 侯金林;李咏茵;唐利波;易璇;古书琴;温春花 - 南方医科大学南方医院
- 2019-07-18 - 2019-11-08 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种外周血B细胞系的构建方法及其应用，本发明中构建的BCL具有永生化生长的特点，BCL中CD19+细胞占比升高，且CD19+BCL中CD138、CD38、CD27表达水平显著高于EBV转化前的CD19+B细胞，且保留了B细胞分泌抗体、提呈抗原的能力。本发明中的BCL可用于筛选优势T细胞免疫反应抗原表位，或制备高效价anti‑HBsAg单克隆抗体，及诱导HBV特异性T细胞系，为“清除乙肝”提供新方向。
- 体外活化记忆性B细胞成浆细胞的方法-201810380061.3
- 杨希;葛良鹏;黄楠;郎巧利;余琳;何麒麟;吴梦;邹贤刚 - 重庆市畜牧科学院
- 2018-04-25 - 2019-11-01 - C12N5/0781
- 本发明属于B细胞的培养或维持技术领域，具体涉及一种体外活化记忆性B细胞成浆细胞的方法，包括以下步骤：用丝裂霉素C处理的NIH‑3T3/mCD40L细胞作为饲养层细胞，10%‑20%FBS的IMDM作为基础培养基，以CpG、IL‑2和IL‑21作为诱导剂，在体外诱导记忆性B细胞转化为浆细胞并分泌抗体。该方法能够显著提高活化效率，提高活化质量；该方法工艺简单，成本低。
- 一种提升改善细胞状态的方法及其应用-201910598578.4
- 李鹏;黄晓涵;蒋治武;姚瑶;程琳;王素娜;吴绮婷;龙有国;黄启键;林思妙 - 广州医科大学附属肿瘤医院
- 2019-07-04 - 2019-09-24 - C12N5/0781
- 本发明涉及一种提升改善细胞状态的方法及其应用，所述方法为：向免疫缺陷小鼠体内移植支原体阳性细胞系，并饲养小鼠，再从小鼠体内分离出细胞系，获得支原体阴性细胞系。该去除细胞中支原体污染的方法相对于目前常用的去除细胞支原体污染的方法其操作流程更为简单也更加安全，同时该方法避免了抗生素和高温因素，可把对细胞的伤害降到最低，且处理周期较短，也能够彻底清除支原体污染且不复发。
- 一种同时分离外周血T、B淋巴细胞的方法-201610402343.X
- 刘持;向阳;秦晓群;刘惠君;瞿湘萍;张珣 - 中南大学
- 2016-06-08 - 2019-09-10 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种同时分离外周血T、B淋巴细胞的方法。该方法是改良的尼龙毛柱分离法，能实现一次性同时分离获得T淋巴细胞核B淋巴细胞两种细胞，细胞的产量高，交叉污染少，对细胞的生物活性无任何影响，便于开展下一步的实验研究。
- GSK-3β抑制剂在体外诱导人体Breg细胞的用途及分离和诱导Breg细胞的方法-201810464290.3
- 夏永祥;陆云杰;吕凌;高骥;周浩明;饶建华 - 夏永祥
- 2018-05-15 - 2019-07-30 - C12N5/0781
- 一种GSK‑3β抑制剂在体外诱导人体Breg细胞的用途，以及利用GSK‑3β抑制剂体外诱导人体Breg细胞的方法，采用GSK‑3β抑制剂在体外诱导人体Breg细胞，以及GSK‑3β抑制剂诱导普通B细胞向Breg细胞转化的效果中，采用GSK‑3β抑制剂诱导Breg细胞诱导纯度高，诱导后Breg炎性细胞因子分泌减少，诱导后Breg抑制功能增强。采用本发明利用GSK‑3β抑制剂体外诱导人体Breg细胞的方法，操作简单，耗时短，纯度高、细胞活性损伤小，转化效率高，细胞活性高，来源广，污染可能性小，能够弥补目前Breg基础和临床研究上数量不足，为Breg细胞的进一步功能研究提供了一种新的实验方法。
- 一种采用TLR7激动剂刺激的自体外周血淋巴细胞的培养方法-201910013238.0
- 孙明辉;陈义;庄志伟;逯晓明 - 山东博森医学工程技术有限公司
- 2019-01-07 - 2019-05-31 - C12N5/0781
- 本发明属于免疫细胞体外培养技术领域，特别涉及一种采用TLR7激动剂刺激的自体外周血淋巴细胞的培养方法，包括如下步骤：用单个核细胞分离管和Percoll分层液从成人外周血中分离出单个核细胞和自体血清，将单个核细胞在外周血淋巴细胞培养基上进行体外培养；对体外培养的单个核细胞分瓶，1号培养瓶用OKT3抗体、OKT28抗体及细胞因子活化剌激，2号培养瓶中加入自体肿瘤抗原、细胞因子和TLR7激动剂培养后，然后合瓶培养，能有效地提高特异性效应细胞群活化效率和扩增效率。本发明充分运用自体肿瘤抗原和过程产物自体血清，对自体肿瘤细胞的杀伤更有针对性，以蠕动泵补充培养基为淋巴细胞扩增创造最优条件，所获得的淋巴细胞亚群具有特异性高杀伤肿瘤细胞的能力。
- 单个B细胞培养方法-201510482333.7
- J·恩德尔;N·舒马赫尔;S·奥夫纳;J·普拉策尔;B·西韦;I·托雷 - 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司
- 2011-05-26 - 2019-05-28 - C12N5/0781
- 本文报导了得到B细胞的方法，其包括以下步骤：a)标记B细胞，b)将标记的B细胞沉积为单细胞，c)和饲养细胞共培养单细胞沉积的B细胞，d)选择步骤c)中增殖和分泌IgG的B细胞并从而得到B细胞。标记可以是IgG+CD19+‑B细胞、IgG+CD38+‑B细胞、IgG+CD268+‑B细胞、IgG‑CD138+‑B细胞、CD27+CD138+‑B细胞或CD3‑CD27+‑B细胞。所述方法可包括在沉积步骤以前，在EL‑4B5培养基中在37℃孵育1小时所述B细胞的步骤。所述方法还可包括在共培养以前离心所述单细胞沉积的B细胞的步骤。在共培养中，可使用包含白介素‑1β和肿瘤坏死因子α和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)Cowans菌株细胞或BAFF或白介素‑2和/或白介素‑10和/或白介素‑6和/或白介素‑4的饲养混合物。
- 一种体外诱导初始B细胞分化为调节性B细胞的方法及其培养条件-201810413845.1
- 施焕中;王雯;翟侃;伊凤双;吴秀芝 - 首都医科大学附属北京朝阳医院
- 2018-05-03 - 2019-04-02 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种体外诱导初始B细胞分化为调节性B细胞的方法及其培养条件。本发明的方法是将初始B细胞在诱导培养基中进行诱导培养；所述诱导培养基由RPMI‑1640培养基、胎牛血清、脂多糖、CD40配体、白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素4、白细胞介素21和白细胞介素23组成。通过本发明提供的诱导培养基培养初始B细胞，可以得到数量充足的CD19+CD24hiCD27+调节性B细胞。本发明诱导培养基不仅可显著提高初始B细胞分化为CD19+CD24hiCD27+调节性B细胞的诱导分化能力，而且还提高了诱导分化后CD19+CD24hiCD27+调节性B细胞的存活率，具有良好的应用前景。
- 含表达异于分泌免疫球蛋白和细胞溶解功能的膜免疫球蛋白的B淋巴细胞系的组合物和方法-201780047988.9
- 罗德里克·A·海德;韦恩·R·金斯沃格尔;盖瑞·L·麦克奈特 - 埃尔瓦有限公司
- 2017-06-08 - 2019-04-02 - C12N5/0781
- 本文公开了用于在分离的细胞毒性B淋巴细胞系中产生一种或多种免疫球蛋白的组合物和方法。分离的细胞系包含分离的B淋巴细胞系，其能够表达对第一抗原具有反应性的至少一种外源掺入的膜免疫球蛋白和对第二抗原具有反应性的至少一种内源性分泌型免疫球蛋白，并且还能够表达传导信号以表达细胞毒性效应分子的至少一种外源掺入的重组B细胞受体。
- 分离外周血免疫细胞的分离方法-201511031155.2
- 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 - 北京弘润天源基因生物技术有限公司
- 2015-12-31 - 2019-02-15 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种分离外周血免疫细胞的分离方法，属于生物技术领域。所述方法包括如下步骤：将抗凝剂处理过的外周血用生理盐水或无血清培养基稀释获得细胞悬液；将含有葡聚糖、磷脂、海藻糖和氨基酸的分离液加入离心管中，分离液的体积不大于离心管体积的1/2；将细胞悬液铺在所述分离液上，在8‑25℃，200g‑800g，10～30min条件下离心，吸取白膜层细胞。本发明使用配制的分离液时，操作者可以直接将细胞悬浮液铺设在分离液上，铺设过程无须过多考虑液面的破坏，对操作者的操作经验要求较低；本发明配方中的全部原料均符合静注级原料药标准，原料不确定性小，安全性高，而且分离得到的免疫细胞并具有较好的杀肿瘤活性。
- 免疫细胞的储存及运输方法-201511031752.5
- 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 - 北京弘润天源基因生物技术有限公司
- 2015-12-31 - 2019-01-22 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种免疫细胞的储存及运输方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：采集外周血或脐带血，稀释，获得细胞悬液；将含有海藻糖，超低粘度海藻酸钠和氨基酸的分离液加入到离心管中，细胞悬液细胞悬液平铺到分离液上，离心，吸取上层血浆备用，吸取白膜层细胞获得淋巴细胞；将所述淋巴细胞与冻存液等比例混合分装于细胞冻存管中；冻存；复苏后将液态细胞悬液移至含有4～8℃生理盐水的离心管中，混匀，离心；在淋巴细胞中加入含有2％海藻糖的保存液中；移入无菌管或转运袋中转运。本发明从分离到冻存再到保存运输均选用符合静注级原料药标准的原料，原料不确定性小，安全性高。
- 分离淋巴细胞的分离方法-201511031167.5
- 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 - 北京弘润天源基因生物技术有限公司
- 2015-12-31 - 2019-01-22 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种分离淋巴细胞的分离方法，属于生物技术领域。本发明包括如下步骤：将符合药用标准的右旋糖酐3～5重量份，海藻糖2～4重量份，超低粘度海藻酸钠0.3～0.8重量份，泛影葡胺1～3重量份，聚二烯丙基二甲基氯化铵0.1～0.15重量份充分溶解于灭菌水配制成100重量份的生理溶液，再经过滤膜过滤除菌得到分离液；将所述分离液加入离心管中，所述分离液的体积不大于离心管体积的1/2；将抗凝剂处理过的样品经平衡盐溶液或无血清培养基稀释后铺在所述分离液上，在8‑25℃，200g‑800g，10～30min条件下离心；所述样品的来源为外周血、脐带血或骨髓。本发明分离得到的淋巴细胞具有较好的杀肿瘤活性。
- 用于分离淋巴细胞的组合物及其分离液-201511029713.1
- 宫喜魁;李若鲲;马艳;马艳玲;郝丽敏 - 北京弘润天源基因生物技术有限公司
- 2015-12-31 - 2019-01-22 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种用于分离淋巴细胞的组合物及其分离液，属于生物技术领域。本发明的用于分离单个细胞的组合物，由以下原料按重量份组成：右旋糖酐1～4份，海藻糖4～6份，超低粘度海藻酸钠0.3～1.5份，泛影葡胺4～7份，L‑甲硫氨酸0.003‑0.006份,L‑缬氨酸0.008‑0.011份和L‑亮氨酸0.01‑0.012份。本发明配方中的全部原料均符合静注级原料药标准，原料不确定性小，安全性高，并且分离后的淋巴细胞具有较好的杀肿瘤活性。
- 兔外周血B细胞的培养体系及培养方法、抗体的制备方法和应用-201811162706.2
- 戴继鸿;詹梦黎 - 杭州华安单抗生物技术有限公司
- 2018-09-30 - 2019-01-18 - C12N5/0781
- 本发明提供了一种兔外周血B细胞的培养体系及培养方法、抗体的制备方法和应用，涉及生物技术领域。该培养体系包括饲养细胞、IL‑4、IL‑10、IL‑21、丝裂原和基础培养基；其中，所述饲养细胞包括稳定表达兔源CD40L的细胞。稳定表达兔源CD40L的细胞作为饲养细胞，CD40L和CD40结合后，可以促进B细胞的生产增殖；IL‑4、IL‑10、IL‑21和丝裂原的协同作用下可以进一步的促进B细胞的增殖和抗体的产生。该兔外周血B细胞的培养方法使用上述培养体系培养即可，可实现B细胞的体外培养。该抗体的制备方法包括使用上述培养体系培养能够产生抗体的兔外周血B细胞，可以持续的促进B细胞增殖并分泌抗体。
- 动物淋巴细胞分离液及其制备方法-201610038667.X
- 郁庆明;靖志安;田莉;姜强;徐炜华;徐念沁 - 南京三生生物技术股份有限公司
- 2016-01-20 - 2019-01-11 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种动物淋巴细胞分离液，包括以下组分及质量百分比：10%泛影酸钠，5.2‑4.4%的聚蔗糖，0.8‑1.6%的非糖基单元的亲水性高分子聚合物，聚蔗糖与非糖基单元的亲水性高分子聚合物的浓度之和为6%，余量为无热源的去离子水，总量为100%；所述动物淋巴细胞分离液在20℃下比重为1.077±0.001g/ml。使用泛影酸钠，替代价格昂贵的泛影葡胺，再和聚蔗糖混合配伍，制备成低成本高效率的动物淋巴细胞分离液，分离效果和泛影葡胺配方一致，生产成本显著性降低；通过添加非糖基单元的亲水性高分子聚合物物质，如聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、聚丙烯醇，显著性缩短上述低成本配方分离淋巴细胞时的细胞成带时间，同时获得的淋巴细胞质量显著性改善，几乎没有血小板的污染。
- 一种永生化类淋巴母细胞系建立的方法和试剂盒-201810789161.1
- 杜飞 - 远见生物科技（上海）有限公司
- 2018-07-18 - 2018-12-18 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种永生化类淋巴母细胞系(Lymphoblastoid cell lines,LCLs)的建立方法，利用EB病毒转化外周血B淋巴细胞，建立所述LCLs。所述方法通过加入抗IL‑2受体α链(CD25)单克隆抗体，抑制T淋巴细胞的活化和增殖，从而提高EB病毒对外周血B淋巴细胞的转化率。本发明还公开了用于EB病毒转化外周血B淋巴细胞为永生化类淋巴母细胞系LCLs的试剂盒，所述试剂盒适用于EB病毒转化人类外周血B淋巴细胞为LCLs，操作简单，转化效率高。
- 一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基及其制备方法和应用-201510448381.4
- 李晓辉;刘强 - 广州达晖生物技术股份有限公司
- 2015-07-27 - 2018-12-18 - C12N5/0781
- 本发明提供了一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基，由基础培养基、转铁蛋白10mg/L转铁蛋白、0.01mg/L亚硒酸钠、110mg/L丙酮酸、1.5mg/L乙醇胺、10mg/L胰岛素、10mg/L‑30mg/L谷氨酰胺替代物、300mg/L脂质型牛血清蛋白、0.001mg/L硫酸铜、0.0005mg/L偏钒酸铵、0.00005mg/L二氯化锰、0.8mg/L硫酸锌、2mg/L维生素E、100mg/L植物血球凝集素(PHA)和10‑50mMpH缓冲系统组成。本发明还提供该培养基的制备方法和应用。本发明的培养基能提高淋巴细胞分化，得到大量处于分裂相的淋巴细胞，且pH值稳定，利于培养基的稳定保存。
- 一种pH值稳定的淋巴细胞培养基及其制备方法和应用-201510448310.4
- 李晓辉;胡可存;刘强 - 广州达晖生物技术股份有限公司
- 2015-07-27 - 2018-12-18 - C12N5/0781
- 本发明提供了一种pH值稳定的培养基。该培养基由1640基础培养基、100mg/L植物血球凝集素(PHA)、体积百分比为20％的小牛血清和5‑50mM甘油磷酸钠/4‑羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)双缓冲系统组成。所述甘油磷酸钠/HEPES双缓冲系统由磷酸缓冲液、甘油磷酸钠、4‑羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)组成，所述磷酸缓冲液含Na2HPO4和KH2PO4。本发明还提供上述培养基的制备方法和在淋巴细胞培养中的应用。本发明的培养基的pH值不受环境中气体成分的影响，又能够稳定淋巴细胞培养时的pH值；利于培养基的长期保存。
- 一种高效分离单个抗原特异性B细胞的方法-201810218543.9
- 翟晋豫;刘玲玲;徐星星;常秋霜;齐华;刘文弟 - 河南赛诺特生物技术有限公司
- 2018-03-16 - 2018-08-24 - C12N5/0781
- 本发明涉及细胞分离技术领域，具体涉及一种高效分离单个抗原特异性B细胞的方法。该方法将抗原偶联的荧光素和感染抗原的外周血单核细胞悬液分别加入半固体培养基中，由于半固体培养基具有的特殊流动性使得目标B细胞分泌的抗体分布在B细胞的四周不发生游离，分布在目标B细胞周围的抗体与半固体培养基中的抗原偶联荧光素进行免疫发应，抗原偶联的荧光素在目标B细胞的周围发生聚集形成荧光亮点，通过观察半固体培养中荧光素的发光现象，挑选荧光亮点即为目标B细胞；目标B细胞分泌抗体的能力越强，会在其周围聚集越多的荧光素，观察到的荧光亮点的亮度就越大，通过观察荧光亮点的亮度分离和鉴别目标B细胞分泌抗体的能力。
- 蛋白-细胞偶联物、其制备方法和用途-201310234603.3
- 夏长青;郭轶先;万岁桂 - 加思葆（北京）医药科技有限公司
- 2013-06-14 - 2018-07-17 - C12N5/0781
- 本发明属于免疫学、生物医学领域，具体涉及一种蛋白‑细胞偶联物，其特征在于，所述蛋白与细胞通过双功能交联剂偶联。本发明还涉及所述蛋白‑细胞偶联物的制备方法和用途。本发明的蛋白‑细胞偶联物可用于预防或治疗多种疾病，例如恶性肿瘤、感染性疾病和自身免疫性疾病等。
- 一种无血清人的外周血淋巴细胞培养基-201510268603.4
- 周海军;吴家波 - 广州和能生物科技有限公司
- 2015-05-22 - 2018-02-27 - C12N5/0781
- 本发明涉及一种生物制剂，尤其涉及一种淋巴细胞培养基。其包括凝集素、基础培养基以及血清替代物，所述凝集素为L型植物血球凝集素，所述基础培养基为RPMI1640基础培养基，所述血清替代物包括牛血清白蛋白、重组人胰岛素、柠檬酸铁和氨基酸母液。本发明的无血清人的外周血淋巴细胞培养基不用动物或人血清，这样可以不仅可以降低培养基成本，还可以降低传播疾病的风险；本发明的无血清人的外周血淋巴细胞培养基所用组分确定，避免了传统血清成分复杂，不同批次间具有质量差异，而导致培养效果波动的问题；本发明提供的细胞培养基淋巴细胞转换率与淋巴细胞分裂指数高，试剂成本低、质量稳定，培养的细胞可用于染色体核型分析的临床诊断。
- 一种获得自身反应性B细胞的方法-201310244248.8
- 王仁喜;黎燕;肖鹤;韩根成;陈国江;侯春梅;沈倍奋;马宁;邢陈 - 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
- 2013-06-20 - 2017-12-01 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种获得自身反应性B细胞的方法，本发明所述的方法材料包括生物素铰链的dsDNA和链亲和素化的免疫磁珠。利用本发明所述的dsDNA免疫磁珠方法分选系统性红斑狼疮小鼠模型和病人的自身反应性B细胞，结果显示本发明所述的方法能够有效地分选出高纯度的自身反应性B细胞。高纯度的自身反应性B细胞对自身抗原dsDNA的刺激能快速增殖并有效地产生自身抗体。本发明所述的方法有效地从系统性红斑狼疮小鼠模型和病人体内获得了高纯度的自身反应性B细胞。这为研究体内稀少的自身反应性B细胞的特性和将来自身反应性B细胞的应用建立细胞分选平台。
- 一种诱导造血干细胞向白细胞分化的方法-201710192853.3
- 周婧 - 周婧
- 2017-03-28 - 2017-08-11 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种诱导造血干细胞向白细胞分化的方法。采用热处理煅烧钛酸锶{111}晶面单晶，产生具有特定功函数性质的表面，继而在其上培养造血干细胞，利用常规的DMEM基础培养基培养14天可获得成熟分化的白细胞。本发明提供的利用材料表面功函数性质的诱导干细胞定向分化的方法不仅操作简单方便，成本极低，可以显著提高造血干细胞向白细胞方向的分化比例，而且可避免动物血清及生化试剂应用的风险和免疫原性，适用在利用干细胞疗法治疗地中海贫血症、白血病等领域。
- 一种人体外周血淋巴细胞培养基及其制备方法-201611213549.4
- 叶宗耀 - 叶宗耀
- 2016-12-24 - 2017-03-22 - C12N5/0781
- 本发明属于细胞培养基技术领域，具体涉及一种人体外周血淋巴细胞培养基及其制备方法。本发明培养基主要包含以下成分RPMI1640培养基，小牛血清，胶原蛋白，透明质酸钠，胰高血糖素，促甲状腺释放激素，白芍总苷，亚油酸，丁二胺，水合葡糖酸铁盐，谷胱甘肽，多聚赖氨酸。本发明培养基能够有效抑制微生物和病毒，试剂稳定性好，培养淋巴细胞转化率与淋巴细胞分裂指数高。
- 一种用于鱼类淋巴细胞的培养方法-201610782341.8
- 沙珍霞;陈亚东;孙璐明;汪林庆;陈松林 - 青岛大学
- 2016-08-31 - 2017-02-22 - C12N5/0781
- 本发明提供一种用于鱼类淋巴细胞的分离及培养方法，本发明并通过优化分离条件参数，成功的获得了鱼类淋巴细胞；采用了抗体、流式细胞仪联用鉴定了淋巴B细胞、淋巴T细胞。并通过优化培养条件和培养基参数，成功获得了可以连续培养72h以上的鱼类淋巴细胞，可满足相关实验的要求。本发明方法实现了鱼类淋巴细胞的体外分离、可控培养等，所需样品少，操作时间短，流程简单、准确性高，成活率高，可广泛应用于鱼类免疫相关功能在细胞水平上的研究。
- 一种体外活化人记忆性B细胞成浆细胞的培养方法-201610711060.3
- 胡萍;魏强;辛洪波;何晶晶 - 南昌大学
- 2016-08-24 - 2016-12-14 - C12N5/0781
- 一种体外活化人记忆性B细胞成浆细胞的培养方法，是利用已辐照的3T3‑CD40L细胞作为饲养层细胞，10%FBS的IMDM作为基础培养液，IL‑2、IL‑21作为生长因子，体外诱导记忆B细胞活化成浆细胞并分泌抗体的过程。本发明所述培养方法操作简单，成本较低，所需记忆B细胞数量少，活化效率以及活化质量高。
- 一种长时间培养B细胞的方法-201610615524.0
- 陈海佳;王一飞;葛啸虎;万桦;张维敏 - 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
- 2016-07-28 - 2016-11-23 - C12N5/0781
- 本发明涉及细胞培养领域，特别涉及一种长时间培养B细胞的方法。本发明首先增加了B细胞的增殖数量，其次排除了使用人血清进行培养，大大增加了细胞的安全性。
- 一种分泌抗原特异性抗体浆细胞的分离方法-201610356287.0
- 赖增祖;叶欣;徐健;杨奎东 - 宁波艾科生物科技有限公司
- 2016-05-26 - 2016-09-21 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种分泌抗原特异性抗体浆细胞的分离方法，通过使用浆细胞标记物CD38或CD138单抗与抗IgG抗体交联的双功能抗体和交联有特定抗原的磁珠分离得到分泌抗原特异性抗体的浆细胞。本发明能够准确获得将分泌抗原特异性的抗体浆细胞，极大地减少了工作量，成功率较高。
- 一种体外人工分离淋巴细胞及冷冻保存的方法-201610247715.6
- 李成毅;朱彤 - 广东常青生命科学研究有限公司
- 2016-04-20 - 2016-06-15 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种体外人工分离淋巴细胞及冷冻保存的方法，包括：抽取静脉血注入采血管，3000rpm离心10分钟；取上层淡黄色血浆作为自体血浆，采血管加特定培养液；第一离心管加Ficoll-Paque Plus，将稀释血样加在其上,400g离心30分钟；第二吸管吸取第一离心管中不透明细胞层转第二离心管；第二离心管加冷特定培养液，250g离心10分钟；弃上清，重悬淋巴细胞于冷特定培养液，洗涤两次，留细胞悬液；将第二离心管中淋巴细胞重悬于冷冻保存液；将淋巴细胞转冻存管，4℃平衡10分钟，按1℃/分钟降温，将细胞存在-150℃气态液氮罐。本发明改良并建立一种能长期冻存在深低温下高活性淋巴细胞体外生产流程，可获得足量高活性淋巴细胞，通过预存淋巴细胞，可择机复苏、培养、回输淋巴细胞。
- 一种能高效扩增人淋巴细胞的无动物源性培养基-201610197482.3
- 谷超 - 谷超
- 2016-03-31 - 2016-05-25 - C12N5/0781
- 本发明公开了一种能高效扩增人淋巴细胞的无动物源性培养基，包括基础培养基，还包括血清替代物和扩增促进剂；所述血清替代物包括重组人血白蛋白、重组人转铁蛋白和重组人胰岛素，还包括脂质、微量元素化合物和维生素；所述脂质包括胆固醇、亚油酸、亚麻酸，所述微量元素化合物包括硝酸铁、亚硒酸钠、硫酸铜和硫酸锌；所述扩增促进剂为化合物Cephaloziellin N。本发明提供的培养基可以显著提高淋巴细胞的增殖倍数，促进淋巴细胞增殖，效果与阳性对照组基本一致，优于不添加扩增促进剂的培养基；本发明提供的培养基可以显著提高淋巴细胞的杀瘤活力，效果优于不添加扩增促进剂的培养基。
- 专利分类
