[发明专利]一种微流体芯片及其改性方法和在检测食品细菌数量上的应用在审
| 申请号： | 201810370194.2 | 申请日： | 2018-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN108753929A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 姜瑜倩;曹旭东;郝星凯;王川丕;周敏;孙美娜;王珍 | 申请（专利权）人： | 绿城农科检测技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/06 |
| 代理公司： | 杭州赛科专利代理事务所(普通合伙) 33230 | 代理人： | 冯年群 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市滨江区长*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种微流体芯片及其改性方法和在检测食品细菌数量上的应用，包括：将微流体芯片上的微流管道内表面的–CH3基团改性为‑OH基团；再向微流管道内通入氨基硅烷试剂；干燥之后，向微流管道内通入表面经由‑COOH改性过的树枝状聚合物；将5’末端氨基化的适配体RCA的引物与其锁式探针的杂交连接产物嫁接到微流管道内表面上的树枝状聚合物上，其中锁式探针为待测目标致病菌的核酸适配体的互补序列，再将RCA反应试剂通入微流管道内，使适配体RCA启动生产串联长链适配体。本发明将两种不同功能的RCA反应结合使用，并采用树枝状聚合物对芯片内表面进行改性，提高检测过程中的目标识别抓取和信号增强，方便实现一体化检测。 | ||
| 搜索关键词： | 改性 树枝状聚合物 微流体芯片 适配体 管道内表面 食品细菌 锁式探针 检测 抓取 氨基硅烷试剂 致病菌 核酸适配体 芯片内表面 一体化检测 待测目标 反应试剂 互补序列 基团改性 末端氨基 目标识别 信号增强 杂交连接 长链 引物 应用 串联 生产 | ||
【主权项】：
1.一种微流体芯片的改性方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将微流体芯片上的微流管道内表面的–CH3基团改性为‑OH基团；(2)所述步骤(1)反应完成之后，向所述微流管道内通入氨基硅烷试剂，进行氨基硅烷反应；(3)干燥之后，向所述微流管道内通入表面经由‑COOH改性过的树枝状聚合物，进行偶联反应；(4)所述步骤(3)反应完成之后，将5’末端氨基化的适配体RCA的引物与其锁式探针的杂交连接产物嫁接到所述微流管道内表面上的树枝状聚合物上，其中所述锁式探针为待测目标致病菌的核酸适配体的互补序列，再将RCA反应试剂通入所述微流管道内，使适配体RCA启动生产串联长链适配体，反应完成后通过加热终止RCA反应，最后用磷酸盐缓冲液通入微流管道内进行清洗。
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