[发明专利]一种人外周血Treg细胞的体外分离扩增方法及其应用在审
申请号: | 201810353887.0 | 申请日: | 2018-04-19 |
公开(公告)号: | CN108546678A | 公开(公告)日: | 2018-09-18 |
发明(设计)人: | 王文娟;刘雪霞;刘芙君;马玎;李宁;周小娇 | 申请(专利权)人: | 王文娟 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/17;A61P15/06 |
代理公司: | 烟台双联专利事务所(普通合伙) 37225 | 代理人: | 牟晓丹 |
地址: | 264010 山东省烟台*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种人外周血Treg细胞的体外分离扩增方法及其应用,属于细胞体外分离扩增方法及其应用技术领域。包括以下步骤:1)、采集原因不明复发性流产患者配偶的外周血,梯度离心分离出外周血单个核细胞;2)、利用磷酸盐缓冲液洗涤所述外周血单个核细胞两次,并对获得的单个核细胞进行计数;3)、通过磁珠分选技术分离出CD4+T细胞、Treg细胞;4)、将Treg细胞进行扩增。本发明不仅可以获得纯度较高的Treg细胞,还可以通过体外扩增的方法获得临床应用所需要的细胞数量,本发明获得的人外周血Treg细胞应用于治疗不明原因复发性流产,能显著提高原因不明反复性流产患者的抱婴率。 | ||
搜索关键词: | 扩增 人外周血 单个核细胞 复发性流产 体外分离 外周血单个核细胞 应用 磷酸盐缓冲液 应用技术领域 磁珠分选 患者配偶 临床应用 梯度离心 体外扩增 外周血 抱婴 流产 洗涤 采集 细胞 治疗 | ||
【主权项】:
1.一种人外周血Treg细胞的体外分离扩增方法,其特征在于包括以下步骤:1)、采集原因不明原因复发性流产患者配偶的外周血,梯度离心分离出外周血单个核细胞;2)、利用磷酸盐缓冲液洗涤所述外周血单个核细胞两次,计数;3)、通过磁珠分选技术分离出CD4+T细胞、Treg细胞;4)、将Treg细胞进行扩增。
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