[发明专利]一种基于核酸适配体-分子印迹荧光传感器的细胞色素c的检测方法

摘要

本发明提供一种基于核酸适配体‑分子印迹荧光传感器的细胞色素c的检测方法包括以下步骤：S1：核酸适配体‑分子印迹荧光传感器的制备；S2：绘制“荧光淬灭强度‑细胞色素c浓度”标准工作曲线，算出工作方程；S3：测定样品中的细胞色素c的含量。本发明的检测方法利用了一种以双键修饰的锰掺杂硫化锌量子点为信号元件，再包裹上核酸适配体‑分子印迹聚合物层的具有对细胞色素c双重识别功能的核酸适配体‑分子印迹荧光传感器，实现了对细胞色素c高选择性、高灵敏性的检测。本发明的检测方法对细胞色素c的线性检测范围为0.20‑2.00μmol/L，线性相关系数为0.9922，检测限为0.054μmol/L，专一性识别因子为3.28。

主权项

1.一种基于核酸适配体‑分子印迹荧光传感器的细胞色素c的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：核酸适配体‑分子印迹荧光传感器的制备首先，由模版分子细胞色素c、巯基修饰的细胞色素c核酸适配体、甲基丙烯酸和交联剂形成预聚合复合物；然后，由预聚合复合物、双键修饰的锰掺杂硫化锌量子点和引发剂形成核酸适配体‑量子点复合物；最后，将核酸适配体‑量子点复合物中模版分子细胞色素c洗脱，得到核酸适配体‑分子印迹荧光传感器；S2：绘制“荧光淬灭强度‑细胞色素c浓度”标准工作曲线，算出工作方程将步骤S1制备的核酸适配体‑分子印迹荧光传感器分散在pH值为7‑8的磷酸缓冲液，再分别与一系列浓度梯度的细胞色素c溶液混合，在温度为20‑30℃条件下，震荡至少50分钟，测试其在595nm处的荧光强度；根据细胞色素c浓度和595nm处的荧光强度，绘制“荧光淬灭强度‑细胞色素c浓度”标准工作曲线，算出工作方程；S3：测定样品中的细胞色素c的含量将步骤S1制备的核酸适配体‑分子印迹荧光传感器分散在pH值为7‑8的磷酸缓冲液中，再样品溶液混合，在温度为20‑30℃条件下，震荡至少50分钟，测试其在595nm处的荧光强度；将所得荧光强度数值带入工作方程得到样品中的细胞色素c的含量。