[发明专利]一种提高大肠杆菌合成的聚（3-羟基丁酸-co-乳酸）中乳酸组分含量的方法

摘要

本发明提供了一种提高大肠杆菌合成的聚(3‑羟基丁酸‑co‑乳酸)中乳酸组分含量的方法，在重组大肠杆菌E.coli MG‑01的基础上，敲除黄素异戊烯基转移酶基因ubiX，和/或敲除D‑乳酸脱氢酶基因dld，和/或替换表达丙酰辅酶A转移酶pctcp的启动子为组成型的ldhA启动子。本发明通过对代谢途径和调控的分析，利用基因工程手段对大肠杆菌进行了改造，获得的菌株在有氧条件下，能提高大肠杆菌中合成的聚(3‑羟基丁酸‑co‑乳酸)中乳酸组分的摩尔百分比。

主权项

1.一种提高大肠杆菌合成的聚(3‑羟基丁酸‑co‑乳酸)中乳酸组分含量的方法，其特征在于，在重组大肠杆菌E.coli MG‑01的基础上进行改造，所述改造途径为，敲除黄素异戊烯基转移酶基因ubiX，和/或敲除D‑乳酸脱氢酶基因dld，和/或替换表达丙酰辅酶A转移酶pct_cp的启动子为组成型的ldhA启动子；所述重组大肠杆菌E.coli MG‑01是以E.coli MG1655为宿主，以启动子trc控制phaA、phaB、phaCm基因的重组表达，以阿拉伯糖启动子控制pct_cp基因的重组表达构建获得，所述phaCm基因为Pseudomonas fluorescens strain 2P24来源的PHA合成酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示。