[发明专利]一种提高大肠杆菌合成的聚(3-羟基丁酸-co-乳酸)中乳酸组分含量的方法有效

专利信息
申请号: 201810246568.X 申请日: 2018-03-23
公开(公告)号: CN110295188B 公开(公告)日: 2021-06-15
发明(设计)人: 吴辉;陆静娴;李志敏;叶勤 申请(专利权)人: 华东理工大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12P7/62;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 代理人: 翟羽
地址: 200237 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 大肠杆菌 合成 羟基 丁酸 co 乳酸 组分 含量 方法
【权利要求书】:

1.一种提高大肠杆菌合成的聚(3-羟基丁酸-co-乳酸)中乳酸组分含量的方法,其特征在于,在重组大肠杆菌E.coli MG-01的基础上进行改造,所述重组大肠杆菌E.coli MG-01是以E.coli MG1655为宿主,以启动子trc控制phaA、phaB、phaCm基因的重组表达,以阿拉伯糖启动子控制pctcp基因的重组表达构建获得,所述phaCm基因为Pseudomonas fluorescensstrain 2P24来源的PHA合成酶突变体,其氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示,所述改造途径为以下四种中的一种,(1)敲除黄素异戊烯基转移酶基因ubiX;(2)敲除黄素异戊烯基转移酶基因ubiX和敲除D-乳酸脱氢酶基因dld;(3)敲除黄素异戊烯基转移酶基因ubiX和替换表达丙酰辅酶A转移酶pctcp的启动子为组成型的ldhA启动子;(4)敲除黄素异戊烯基转移酶基因ubiX,敲除D-乳酸脱氢酶基因dld和替换表达丙酰辅酶A转移酶pctcp的启动子为组成型的ldhA启动子;所述ubiX的序列如NCBI-Gene ID:949033所示,所述dld的序列如NCBI-GeneID:946653所示,所述ldhA启动子的序列如SEQ ID NO:16所示。

2.利用权利要求1所述方法制备得到的代谢工程大肠杆菌菌株。

3.权利要求1所述方法在制备聚(3-羟基丁酸-co-乳酸)中的应用。

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