[发明专利]一种高通量快速筛选产(R)-2-(4-羟基苯氧基)丙酸菌株的方法有效
| 申请号： | 201810238274.2 | 申请日： | 2018-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN108486209B | 公开（公告）日： | 2022-03-18 |
| 发明（设计）人： | 薛亚平;郑裕国;王美欣;胡海峰;王远山;周海岩 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高通量快速筛选高产R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸菌株的方法，所述方法按如下步骤进行：将待测菌株以R‑2‑苯氧基丙酸为底物经发酵培养获得的发酵液离心，取上清液作为待测样品；将待测样品与显色剂混合，在25‑50℃、pH7.0‑10.0的条件下反应15‑45min，取反应液测550nm处吸光值，根据(R)‑HPOPA标准曲线获得待测样品中(R)‑HPOPA含量，筛选获得高产(R)‑HPOPA的菌株；本发明方法反应时间为35分钟，(R)‑HPOPA测定的范围为0.5‑4g/L，平均回收率为98.5％‑100.9％，具有高效性、灵敏性、可靠性，极大的提高了筛选的效率，节约了时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通量 快速 筛选 羟基 苯氧基 丙酸 菌株 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高通量快速筛选高产R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸菌株的方法，其特征在于所述方法按如下步骤进行：将待测菌株以R‑2‑苯氧基丙酸为底物经发酵培养获得的发酵液离心，取上清液作为待测样品；将待测样品与显色剂混合，在25‑50℃、pH7.0‑10.0的条件下反应15‑45min，取反应液测550nm处吸光值，根据R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸标准曲线获得待测样品中R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸含量，筛选获得高产R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸的菌株；所述显色剂是将铁氰化钾溶于4‑氨基安替比林试剂配制成浓度10‑70g/L，所述4‑氨基安替比林试剂终浓度组成：6‑10g/L 4‑氨基安替比林，15‑20mM Na2CO3，2.0M NaOH调节pH到10.0，溶剂为去离子水；所述R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸标准曲线是用R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸水溶液替代待测样品，在相同条件下测550nm处吸光值，以R‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸水溶液浓度为横坐标，550nm处吸光值为纵坐标制成。
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