[发明专利]一种合成乳酰-N-新四糖的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用在审
申请号: | 201810206004.3 | 申请日: | 2018-03-13 |
公开(公告)号: | CN108410787A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 刘龙;王淼;陈坚;堵国成;李江华;董晓敏 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/75;C12P19/18;C12P19/26 |
代理公司: | 北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 | 代理人: | 张伟朴 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种合成乳酰‑N‑新四糖的重组枯草芽孢杆菌,所述重组枯草芽孢杆菌在枯草芽孢杆菌168基因组上重组整合有乳糖透性酶基因,及在枯草芽孢杆菌168中转化有包含β‑1,3‑N‑葡糖氨基转移酶基因和β‑1,4‑半乳糖转移酶基因的质粒。本发明利用枯草芽孢杆菌自身代谢途径中的尿苷二磷酸半乳糖,乙酰氨基葡萄糖尿苷二磷酸,作为前体物质,仅需要从外源添加乳糖并在乳糖透性酶的作用下转入细胞,合成乳酰‑N‑新四糖,并分泌到胞外。本发明的重组枯草芽孢杆菌合成乳酰‑N‑新四糖在胞外积累量达到1071mg/L,为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产乳酰‑N‑新四糖奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 重组枯草芽孢杆菌 四糖 枯草芽孢杆菌 乳糖 合成 尿苷二磷酸 透性酶 氨基转移酶基因 乙酰氨基葡萄糖 半乳糖转移酶 代谢工程 代谢途径 前体物质 半乳糖 基因组 基因 分泌 构建 外源 整合 质粒 转入 细胞 积累 转化 应用 改造 生产 | ||
【主权项】:
1.一种合成乳酰‑N‑新四糖的重组枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述重组枯草芽孢杆菌在枯草芽孢杆菌168基因组上重组整合有乳糖透性酶基因,及在枯草芽孢杆菌168中转化有包含β‑1,3‑N‑葡糖氨基转移酶基因和β‑1,4‑半乳糖转移酶基因的质粒。
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