[发明专利]一种抗菌肽混合物及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201810146214.8 | 申请日： | 2018-02-12 |
| 公开（公告）号： | CN108220273B | 公开（公告）日： | 2019-01-29 |
| 发明（设计）人： | 姚云昕 | 申请（专利权）人： | 浙江艾格生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/36 | 分类号： | C12N9/36;A61K38/47;A61P31/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈自军 |
| 地址： | 313100 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种来源于鸡蛋溶菌酶的抗菌肽混合物及其制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。所述抗菌肽混合物的制备方法，包括：利用碱性蛋白酶对鸡蛋溶菌酶进行酶解得到粗提物，经分离纯化，收集具有抗菌活性的纯化产物，获得所述的抗菌肽混合物。本发明利用碱性蛋白酶对鸡蛋溶菌酶进行酶解，其酶解产物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性较鸡蛋溶菌酶的抑菌活性提高了40％，其抗菌活性显著提升，扩大了鸡蛋溶菌酶的应用范围；本发明提供的制备工艺具有简单、快速、高效的特点，适合工业化生产。 | ||
| 搜索关键词： | 鸡蛋溶菌酶 混合物 抗菌肽 制备方法和应用 碱性蛋白酶 抗菌活性 抑菌活性 酶解 分子生物学技术 金黄色葡萄球菌 纯化产物 分离纯化 酶解产物 制备工艺 粗提物 制备 应用 | ||
【主权项】：
1.一种抗菌肽混合物的制备方法，其特征在于，包括：利用碱性蛋白酶对鸡蛋溶菌酶进行酶解得到粗提物，经分离纯化，收集具有抗菌活性的纯化产物，获得所述的抗菌肽混合物；所述碱性蛋白酶为由细菌原生质体诱变选育出的地衣芽孢杆菌2709，经深层发酵、提取及精制而成的一种蛋白水解酶，碱性蛋白酶相对鸡蛋溶菌酶的添加量为0.06‑1g/g；酶解体系的pH值为9.0‑11.0，酶解的温度为40‑70℃，酶解结束后，利用超滤膜截留分子量≥500Da的酶解产物，得到粗提物；采用离子交换层析进行分离纯化，包括以下步骤：(1)取DEAE‑sepharose F.F离子交换剂装入层析柱中，平衡；(2)加入所述粗提物，再以0.1‑0.5mol/L氯化钠溶液进行梯度洗脱，收集得到若干管洗脱产物，分别进行抑菌活性检测，合并抑菌活性大于鸡蛋溶菌酶抑菌活性的洗脱产物。
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