[发明专利]基于分子标签和二代测序降低测序错误的测序方法、试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201810067545.2 | 申请日： | 2018-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN108148900A | 公开（公告）日： | 2018-06-12 |
| 发明（设计）人： | 于丹;姚旭梅;涂小年;李小花;刘朝煜 | 申请（专利权）人： | 深圳因合生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 深圳市徽正知识产权代理有限公司 44405 | 代理人： | 李想 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种基于分子标签和二代测序降低测序错误的测序方法、试剂盒以及其应用，测序方法包括：S1.针对每个样本合成4‑16种含有不同固定特异序列标签的接头的正链P5和反链P7，将P5和P7退火，形成Y字型接头；S2.将模板DNA末端补平，并在3’端添加A碱基；S3.将Y字型接头连接到处理后的模板DNA两端；S4.回收连接上接头的模板DNA，并用带有样本标签的接头引物对模板DNA进行富集扩增；S5.回收经富集扩增的产物；S6.对富集扩增产物进行二代测序。本发明方法可有效识别双链DNA原始模板中的突变，尤其是不对称突变,因而可有效识别从第一次富集扩增开始引入的扩增错误,在Illumina单端和双端样本标签测序模式下，通过样本独有的4‑16种接头的固定特异序列，可有效解决样本标签漂移问题。 | ||
| 搜索关键词： | 测序 模板DNA 样本 富集 扩增 分子标签 特异序列 有效识别 标签 试剂盒 突变 漂移 退火 标签测序 接头连接 接头引物 扩增产物 有效解决 原始模板 回收 双链DNA 不对称 上接头 补平 单端 反链 双端 正链 应用 并用 合成 引入 | ||
【主权项】：
一种基于分子标签和二代测序降低测序错误的测序方法，其特征在于，所述测序方法包括如下步骤：S1.针对不同样本，合成4‑16种含有不同固定特异序列标签的接头的正链P5和反链P7，将各种接头的P5和P7进行退火，形成4‑16种Y字型接头；S2.将模板DNA进行末端补平，并在补平后的3’端添加A碱基；S3.将4‑16种Y字型接头连接到步骤S2处理后的模板DNA的两端；S4.回收连接上接头的模板DNA，并用带有样本标签的接头引物对回收的模板DNA进行富集扩增；S5.回收经步骤S4富集扩增的产物；S6.对富集扩增产物进行二代测序。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于深圳因合生物科技有限公司，未经深圳因合生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810067545.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
