[发明专利]一种KASP结合口腔拭子无提取在QPCR平台进行人SNP基因分型的方法在审
申请号: | 201810064682.0 | 申请日: | 2018-01-23 |
公开(公告)号: | CN108179175A | 公开(公告)日: | 2018-06-19 |
发明(设计)人: | 傅延;张鸿;张慧;徐子静 | 申请(专利权)人: | 安徽微分基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6827 | 分类号: | C12Q1/6827 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 238014 安徽省合肥市巢湖经济开发区龙泉路*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | 本发明公开了一种KASP结合口腔拭子无提取在QPCR平台进行人SNP基因分型的方法,包括以下步骤:步骤一,收集样本;步骤二,配制KASP反应体系;步骤三,将混匀后的溶液放入QPCR仪中,输入实验信息,选择genotyping目录下的程序设置;步骤四:反应完成后下机进行数据分析并收集基因分型数据。本发明改进了DNA模板在无提取的条件下直接进行分型实验,能够降低实验成本,节省时间,能够用于大量样本的基因检测,使人SNP基因分型成本降低,并且具有灵活性。 | ||
搜索关键词: | 拭子 口腔 样本 程序设置 基因分型 基因检测 实验成本 实验信息 数据分析 放入 分型 混匀 配制 改进 | ||
【主权项】:
1.一种KASP结合口腔拭子无提取在QPCR平台进行人SNP基因分型的方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一,收集样本:a:被检测人员用生理盐水漱口,半小时后用棉棒沿口腔外壁刮取口腔侧壁细胞,置于2mL保存管中;b:对保存管使用600ul无核水重悬,制备重悬口腔细胞;步骤二,配制KASP反应体系:反应体系的成分包括MasterMix、引物、样本,取总体积五分之一的重悬口腔细胞加入到反应体系中,然后混匀;步骤三,将混匀后的溶液放入QPCR仪中,输入实验信息,选择genotyping目录下的程序设置:a:选择94℃工作2‑4min;b:选择94℃工作10‑30s;c:选择65℃工作30‑90s;d:b‑c步骤为降落PCR,每个循环降低0.8℃,共10个循环工作;e:选择94℃工作10‑30s;f:选择57℃工作30‑90s;g:e‑f步骤进行30个循环工作;h:选择60℃工作1min后收集荧光;步骤四:反应完成后下机进行数据分析并收集基因分型数据。
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