[发明专利]利用携带Xist Tale抑制性转录因子R6的R6-MEF制备饲养层细胞的方法有效
| 申请号： | 201810041514.X | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN108251377B | 公开（公告）日： | 2021-08-27 |
| 发明（设计）人： | 张金吨;李喜和 | 申请（专利权）人： | 内蒙古大学;内蒙古赛科星家畜种业与繁育生物技术研究院有限公司;内蒙古赛科星繁育生物技术（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/0735;C12N5/074 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 010020 内蒙古自*** | 国省代码： | 内蒙古;15 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用转染了R6的MEF制备新型饲养层细胞的方法，首先利用结合于Xist第一内含子区的基于类转录激活效应物样Tale的抑制性转录因子R6转染MEF获得永生型MEF细胞系R6‑MEF，经过对多种R6‑MEF细胞系筛选后，选择多能性基因表达较高的R6‑MEF细胞系，经丝裂霉素处理后获得新型饲养层细胞R6‑feeder，获得的饲养层细胞能够很好的维持胚胎干细胞ESC和诱导性多能干细胞的多能性iPSC。该方法不仅为干细胞的培养和研究提供了新的选择，而且为研究如何获得并提高人、猪和牛等其它哺乳动物iPSCs提供了新的技术和理论基础。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 携带 xist tale 抑制 转录 因子 r6 mef 制备 饲养 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用转染Xist Tale抑制性转录因子R6的MEF制备饲养层细胞的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)细胞制备获取胎鼠的成纤维细胞Oct4‑GFP MEFs；获取R6‑MEF细胞系；2)获得新型饲养层细胞R6‑feeder从获得的R6‑MEF细胞系中挑选多能性基因表达较高的细胞系并增至150mm培养皿，待细胞汇合度达到80％时添加丝裂霉素C，最后收集细胞计数并冻存。
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