[发明专利]单价不对称串联Fab双特异性抗体

摘要

本发明提供可以结合两个表位或两个抗原的单价、不对称串联Fab双特异性抗体，包含该抗体的组合物、该抗体的用途、制备该抗体的方法、编码该抗体的核酸和包含该核酸的宿主细胞。

主权项

1.包含多肽链(a)、(b)、(c)和(d)的单价不对称串联Fab双特异性抗体(MAT‑Fab抗体)，其中：(a)是重多肽链(“重链”)，其中所述重链包含(从氨基端至羧基端)：VL_A‑CL‑VH_B‑CH1‑铰链‑CH2‑CH3m1，其中：VL_A是直接与CL融合的人免疫球蛋白轻链可变结构域，CL是人轻链恒定结构域，其中VL_A‑CL是识别第一抗原或表位的第一Fab结合单元的免疫球蛋白轻链组分并与VH_B直接融合，其中VH_B是与CH1直接融合的人免疫球蛋白重链可变结构域，CH1是人免疫球蛋白重链CH1恒定结构域，其中VH_B‑CH1是识别第二抗原或表位的第二Fab结合单元的免疫球蛋白重链组分，并且其中VH_B‑CH1与铰链‑CH2直接融合，其中铰链‑CH2是免疫球蛋白重链的铰链‑CH2区，并且其中铰链‑CH2与CH3m1直接融合，CH3m1是第一人免疫球蛋白重链CH3恒定结构域，其已经用一个或多个杵臼进入孔洞(KiH)突变进行了突变以在所述CH3m1恒定结构域中形成结构杵臼或结构孔洞；(b)是包含VH_A‑CH1的第一MAT‑Fab轻链，其中VH_A是与CH1直接融合的人免疫球蛋白重链可变结构域，CH1是人免疫球蛋白重链CH1恒定结构域，并且其中VH_A‑CH1是所述第一Fab结合单元的免疫球蛋白重链组分；(c)是包含VL_B‑CL的第二MAT‑Fab轻链，其中VL_B是与CL直接融合的人免疫球蛋白轻链可变结构域，CL是人免疫球蛋白轻链CL结构域，并且其中VL_B‑CL是所述第二Fab结合单元的免疫球蛋白轻链组分；和(d)是包含铰链‑CH2‑CH3m2的Fc多肽链(Fc链)，其中铰链‑CH2是免疫球蛋白重链的铰链‑CH2区并且其中铰链‑CH2与CH3m2直接融合，CH3m2是第二人免疫球蛋白重链CH3恒定结构域，其已经用一个或多个杵臼进入孔洞(KiH)突变进行了突变以在所述CH3m2恒定结构域中形成结构杵臼或结构孔洞；条件是：在重链的CH3m1结构域已经突变形成结构杵臼时，Fc链的CH3m2结构域已突变形成互补的结构孔洞，以促进CH3m1结构域与CH3m2结构域的配对；和在重链的CH3m1结构域已经突变形成结构孔洞时，Fc链的CH3m2结构域已突变形成互补的结构杵臼，以促进CH3m1结构域与CH3m2结构域的配对；和所述MAT‑Fab抗体任选地在CH3m1结构域和CH3m2结构域中包含突变以引入半胱氨酸残基，以在CH3m1结构域与CH3m2结构域的配对中促进二硫键形成。