[发明专利]单细胞转录物测序在审
| 申请号： | 201780044623.0 | 申请日： | 2017-07-12 |
| 公开（公告）号： | CN109661474A | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 肯尼斯·J·里瓦克;理查德·A·费克特 | 申请（专利权）人： | 富鲁达公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 王玮玮;郑霞 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本文描述了用于制备用于来自细胞群体的RNA的单细胞转录物测序的DNA模板的方法。该方法需要将来自群体的细胞分配到单独的反应体积中，使得多个单独的反应体积各自含有单个分离的细胞，其中细胞在分配之前已经用固定剂处理。然后使分离的细胞透化或破碎，并通过逆转录物制备cDNA，然后扩增。还提供了用于从单细胞中的T细胞受体或免疫球蛋白有效产生DNA模板的新化学方法(chemistry)。 | ||
| 搜索关键词： | 细胞 转录物 测序 制备 免疫球蛋白 单个分离 细胞群体 固定剂 逆转录 分配 扩增 透化 破碎 群体 | ||
【主权项】：
1.一种制备用于来自细胞群体的RNA的单细胞转录物测序的DNA模板的方法，所述方法包括：将来自所述群体的细胞分配到单独的反应体积中，使得多个单独的反应体积各自包含单细胞，其中所述细胞在分配之前已经用固定剂处理，其中所述固定剂包含细胞透化固定剂，所述细胞透化固定剂使得能够以比不存在所述细胞透化固定剂时更高的效率从来源于单细胞的转录物产生DNA模板；透化或破坏每个单独的反应体积中的每个细胞；从每个单独的反应体积中的RNA逆转录cDNA；和扩增所述cDNA以产生DNA模板，其中所述扩增掺入促进所述DNA模板的DNA测序的一种或更多种核苷酸序列。
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