[发明专利]因子XA衍生物的制备在审
| 申请号： | 201780041530.2 | 申请日： | 2017-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN110167575A | 公开（公告）日： | 2019-08-23 |
| 发明（设计）人： | 马克·卡巴兹;帕梅拉·B·康利;卢根民 | 申请（专利权）人： | 博尔托拉制药公司 |
| 主分类号： | A61K38/00 | 分类号： | A61K38/00;A61K38/36;A61K38/48;C07K14/745 |
| 代理公司： | 广州文冠倪律知识产权代理事务所(普通合伙) 44348 | 代理人： | 倪小敏;何锦标 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本公开提供了用于大规模制造fXa衍生蛋白从而获得高纯度蛋白质产物的高产率的方法。所述方法可包括将洗涤剂加入含有编码所述蛋白质的多核苷酸构建体的样品中，以及通过基于大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)的亲和色谱、离子交换和混合模式色谱和疏水相互作用来纯化所述蛋白质。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白质 大豆胰蛋白酶抑制剂 多核苷酸构建体 高纯度蛋白质 大规模制造 洗涤剂 混合模式 离子交换 亲和色谱 衍生蛋白 高产率 因子XA 色谱 疏水 制备 | ||
【主权项】：
1.一种用于制备由多核苷酸构建体表达的多肽产物的方法，所述多核苷酸构建体包括SEQ ID NO: 7的核酸序列或编码与由SEQ ID NO: 7编码的氨基酸序列具有至少90%序列同一性的氨基酸序列的核酸序列，所述方法包括：将洗涤剂加入含有所述多核苷酸构建体和由所述多核苷酸构建体表达的多肽产物的样品中；将所述样品加载到基于大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)的亲和色谱中，并用第一洗脱缓冲液洗脱所述多肽以产生第一洗脱样品，其中所加载的所述样品不含有机溶剂；将所述第一洗脱样品加载到离子交换和混合模式色谱中，并用包含至少1 M无机盐的第二洗脱缓冲液洗脱所述多肽以产生第二洗脱样品；以及将所述第二洗脱样品加载到疏水相互作用色谱中，并用包含至少2 mM氯化钠的第三洗脱缓冲液洗脱所述多肽，由此制备包含所述多肽产物的纯化的样品。
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