[发明专利]植物甜蛋白的细胞外分泌方法在审
申请号: | 201780020439.2 | 申请日: | 2017-01-27 |
公开(公告)号: | CN109310119A | 公开(公告)日: | 2019-02-05 |
发明(设计)人: | A·达基帕提;A·V·巴拉甘加哈 | 申请(专利权)人: | 麦哲伦生命科学公司 |
主分类号: | A23L2/60 | 分类号: | A23L2/60;C12N15/03;C12N1/21 |
代理公司: | 北京市磐华律师事务所 11336 | 代理人: | 董巍;李敬 |
地址: | 印度海*** | 国省代码: | 印度;IN |
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摘要: | 本发明公开了一种以提高的产率分泌植物甜蛋白的方法。 | ||
搜索关键词: | 植物甜蛋白 细胞外分泌 产率 分泌 | ||
【主权项】:
1.一种具有提高的产量的植物甜蛋白的细胞外分泌的方法,包括:(a)将核苷酸序列与表达载体连接以获得DNA构建体,所述核苷酸序列编码与植物甜蛋白偶联的信号前导序列,并通过转化将所述构建体导入BL21(DE3)大肠杆菌细胞;(b)在葡萄糖的存在下,在培养基中培养步骤(a)携带重组构建体的转化细胞,并用选自IPTG或乳糖的试剂诱导蛋白质表达,经过范围从2小时至72小时的时间段,以在所述培养基中获得植物甜蛋白的分泌物,和(c)诱导2‑72小时后将培养基与细胞分离,并从澄清的培养基纯化植物甜蛋白。
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