[发明专利]一种对引物测序的方法有效
| 申请号： | 201711490028.8 | 申请日： | 2017-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN107937503B | 公开（公告）日： | 2018-10-26 |
| 发明（设计）人： | 窦坤 | 申请（专利权）人： | 北京睿博兴科生物技术有限公司广州分公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙) 44387 | 代理人： | 颜春艳 |
| 地址： | 510535 广东省广州市黄*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种对引物测序的方法，包括以下步骤：以引物Z和引物Y2作为PCR引物对，将质粒模板DNA经PCR扩增出模板DNA1；以引物X和引物Y2作为PCR引物对，将模板DNA1经PCR扩增出待测DNA2；使用引物Y2对待测DNA2进行Sanger法测序，即测得引物X的序列；其中，引物X为待测序的引物；引物Y2为一条已知的通用引物；引物Z由引物X的3'端连接引物Y1构成，引物Y1为另一条已知的通用引物。该方法既能识别待测序的引物的序列长短与总分子量，又能精确地鉴定待测序的引物的序列中的每一个碱基，其检测结果百分百准确；该方法的各步骤操作简单；因此，所述对引物测序的方法具有广阔的应用前景，例如可用于药物研发、生物诊断试剂研发、基因工程等相关技术领域。 | ||
| 搜索关键词： | 引物 测序 对引物 通用引物 基因工程 检测结果 生物诊断 药物研发 质粒模板 碱基 可用 研发 应用 | ||
【主权项】：
1.一种对引物测序的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：在扩增体系中，以引物Z和引物Y2作为PCR引物对，将质粒模板DNA经PCR扩增出模板DNA1，然后采用琼脂糖凝胶电泳法回收模板DNA1；步骤二：在扩增体系中，以引物X和引物Y2作为PCR引物对，将模板DNA1经PCR扩增出待测DNA2，然后采用琼脂糖凝胶电泳法回收待测DNA2；步骤三：将待测DNA2的原液稀释至浓度为2.5～5ng/ul，然后，使用引物Y2对待测DNA2进行Sanger法测序，即测得引物X的序列；其中，所述引物X为待测序的引物；所述引物Y2为一条已知的通用引物；所述引物Z由所述引物X的3'端连接引物Y1构成，所述引物Y1为另一条已知的通用引物；其中，所述步骤一中的扩增体系包含：![]()
其中，所述步骤二中的扩增体系包含：![]()
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