[发明专利]一种基于CRISPR-Cas13a的抑制真核细胞中基因表达水平的方法及其应用有效
| 申请号： | 201711349268.6 | 申请日： | 2017-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN108285905B | 公开（公告）日： | 2021-01-29 |
| 发明（设计）人： | 聂广军;赵潇 | 申请（专利权）人： | 国家纳米科学中心 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君;王璐 |
| 地址： | 100190 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 涉及基因工程领域，具体公开了一种基于CRISPR‑Cas13a的抑制真核细胞中基因表达水平的方法及其应用。通过设计并合成与目的基因mRNA中某段序列互补的向导RNA，与Cas13a蛋白形成Cas13a‑向导RNA复合物；在真核细胞中，该复合物在向导RNA的引导下，与序列互补的目的基因mRNA结合并激活Cas13a蛋白的RNA降解活性，从而引起目的基因mRNA的降解和表达水平抑制。另外，通过向导RNA的位置筛选，以及人为添加错配的方式，该方法可以高效并特异性抑制单碱基突变的癌基因表达水平，同时不影响野生型基因表达。通过向导RNA设计，本方法可用于真核细胞中的基因表达沉默以及单碱基突变的癌基因表达特异性抑制，具有特异性高、稳定准确、简便快速的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 crispr cas13a 抑制 真核细胞 基因 表达 水平 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于CRISPR‑Cas13a的抑制真核细胞中基因表达水平的方法，其特征在于，通过设计并合成与目的基因mRNA中某段序列互补的向导RNA，与Cas13a蛋白形成Cas13a‑向导RNA复合物；在真核细胞中，该复合物在向导RNA的引导下，与序列互补的目的基因mRNA结合并激活Cas13a蛋白的RNA降解活性，从而引起目的基因mRNA的降解和表达水平抑制。
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