[发明专利]α-酮戊二酸依赖型酶的酶活检测试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201711346017.2 | 申请日： | 2017-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN109929908A | 公开（公告）日： | 2019-06-25 |
| 发明（设计）人： | 张良;罗静;张会冰;孟周文理 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学医学院 |
| 主分类号： | C12Q1/32 | 分类号： | C12Q1/32;C12Q1/26 |
| 代理公司： | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开α‑酮戊二酸依赖型酶的酶活检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括还原型辅酶Ⅱ(NADPH)或者还原型辅酶Ⅰ(NADH)中的一种，异柠檬酸脱氢酶IDH突变体蛋白和缓冲盐，所述IDH突变体蛋白是指IDH特定氨基酸突变后所获得的具有催化α‑酮戊二酸(2‑OG)新功能的IDH突变体蛋白。作为一个优选方案，所述试剂盒还包括竞争亚铁离子的金属离子。本发明提供了一种高效率高精确度检测α‑酮戊二酸含量的方法，可用于检测α‑酮戊二酸依赖型酶的酶催化活性，测定其酶动力学参数，及针对该类型酶展开高通量药物筛选。该方法解决了α‑酮戊二酸依赖型酶的酶活检测操作繁琐，准确度和可重复性差，通量低，难以进行高通量药物筛选等诸多问题。 | ||
| 搜索关键词： | 酮戊二酸 试剂盒 依赖型 突变体蛋白 酶活检测 高通量药物筛选 还原型辅酶 异柠檬酸脱氢酶 氨基酸突变 酶催化活性 金属离子 可重复性 酶动力学 亚铁离子 准确度 高效率 缓冲盐 类型酶 新功能 检测 可用 通量 催化 优选 应用 | ||
【主权项】：
1.α‑酮戊二酸依赖型酶的酶活检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括还原型辅酶Ⅱ或者还原型辅酶Ⅰ中的一种，异柠檬酸脱氢酶IDH突变体蛋白和缓冲盐，所述IDH突变体蛋白是指IDH特定氨基酸突变后所获得的具有催化α‑酮戊二酸新功能的IDH突变体蛋白。
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