[发明专利]一种陆地棉早熟分子育种相关SSR标记位点的鉴定方法

摘要

本发明公开了一种陆地棉早熟分子育种相关SSR标记位点的鉴定方法。以中晚熟棉花品种鲁棉研37号为母本，以早熟棉花品种鲁棉研19号为父本，杂交1代，再自交1代获得F2，在F2群体中选择1/8的早熟株系和1/8的晚熟株系，种植F3，自交获得F4，利用F2群体进行早熟相关SSR标记位点的第一次鉴定，最后进行卡方分析，初步确定受苗蕾期性状选择有效的陆地棉早熟分子育种相关SSR标记。利用F4群体进行早熟相关SSR标记位点的第二次鉴定，最后进行卡方分析，最终确定受苗蕾期性状选择有效的陆地棉早熟分子育种相关SSR标记。本发明的有益效果是为陆地棉早熟分子育种提供了可靠的分子标记位点支持。

主权项

1.一种陆地棉早熟分子育种相关SSR标记位点的鉴定方法，其特征在于按照以下步骤进行：1)以中晚熟棉花品种鲁棉研37号为母本，以早熟棉花品种鲁棉研19号为父本，杂交1代，再自交1代获得F2，F2代按单株收获；依据苗蕾期性状，在F2群体中选择1/8的早熟株系和1/8的晚熟株系，种植F3，自交获得F4，每代都是混收混种；2)利用F2群体进行早熟相关SSR标记位点的第一次鉴定：F2种植，应用CTAB法提取DNA，结合陆地棉早熟性的连锁分析和关联分析研究结果，选择已鉴定到的棉花早熟性相关SSR引物进行PCR扩增，然后对单个SSR标记进行独立性测验，在进行SSR分子标记基因型分析时，将亲本鲁棉研37号的带型记为1，将亲本鲁棉研19号的带型记为2，两个亲本的互补带型记为3；依据苗蕾期性状对F2群体进行选择处理，在F2群体中选择1/6的早熟单株个体构建F2代棉花早熟性定向选择群体；最后进行卡方分析，初步确定受苗蕾期性状选择有效的陆地棉早熟分子育种相关SSR标记；3)利用F4群体进行早熟相关SSR标记位点的第二次鉴定：F4种植，每株提取DNA后，再利用早熟性相关SSR引物确定F4单株的基因型，依据苗蕾期性状对F4群体进行选择处理，在F4群体中选择1/3的早熟单株个体构建F4代棉花早熟性定向选择群体，然后对单个SSR标记进行独立性测验，最后进行卡方分析，最终确定受苗蕾期性状选择有效的陆地棉早熟分子育种相关SSR标记。