[发明专利]一种高效液相检测灯盏花成分的方法

摘要

本发明属于医药领域，具体涉及一种高效液相检测灯盏花成分的方法，本发明所述检测方法，包括如下步骤(a)提供10种样品对照品溶液和供试样品溶液；(b)用HPLC‑VWD按外标法对步骤(a)供试样品溶液中的10种成分含量进行分析，其特征采用高效液相，以十八烷基硅烷键合胶为填充剂，色谱条件，色谱柱:未加保护柱EC‑C18 2.7μm，0.2%磷酸+5%乙腈为流动相A相，0.2%磷酸+40%甲醇+40%乙腈为有机相B相，6次线性梯度变换洗脱，流速1.000 mL/min，柱温40℃，检测波长335nm。测定了10种成分，停止时间30min，后运行6min。本发明增加了现有高效液相同时检测灯盏花成分，专属性强，快捷灵敏，准确，精密度好。通过该方法检测，可以提高灯盏花成分检测效率，节省资源。

主权项

1.一种高效液相检测灯盏花成分的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一，灯盏花对照品溶液配制；步骤二，供测试品溶液处理；步骤三，确定液相色谱条件；所述步骤一为：分别精密称取咖啡酸、绿原酸、灯盏乙素、异绿原酸B、异绿原酸A、1 ,5‑二咖啡酰奎宁酸、飞鹏酯乙、芹菜素、异绿原酸C和野黄芩素这10种成分的标准品10mg于10mL容量瓶中，用浓度70%甲醇溶解稀释至刻度，作为标准品储备液，分别量取所述10种成分的标准品储备液各1mL于10mL容量瓶混合，并用浓度70%甲醇稀释至刻度，摇匀，得到0 .1mg/mL的对照品溶液；采用0.45μm有机微孔滤膜过滤于液相进样瓶，进样；所述步骤二为：采摘灯盏花叶片，干燥箱烘干或自然风干，磨碎叶片，精密称取灯盏花粉末0.500g于100mL锥形瓶中，精密加入浓度70%甲醇50mL，浸泡过夜，于功率250W和频率40kHz超声下提取30分钟，用70%甲醇补足减失的体积，摇匀，转移溶液至离心管中离心，用1mL注射器取上清液过0.45μm有机微孔滤膜过滤于液相进样瓶，进样；所述步骤三为：以十八烷基硅烷键合胶为填充剂，选择色谱柱产品参数：未加保护柱EC‑C18 2.7μm的色谱柱，以0.2%磷酸+5%乙腈为流动相A相，0.2%磷酸+40%甲醇+40%乙腈为流动相B相，梯度洗脱，用液相色谱仪检测步骤二所得供测试品溶液和步骤一所得10种成分的对照品溶液，选择HPLC‑VWD按外标法分析所得到的成分含量；设定梯度如下表所示：设定流速为1 .000 mL/min；设定检测波长为335nm；设定柱温为40℃；设定进样量为5 .00 μL。