[发明专利]一种高效液相检测灯盏花成分的方法

权利要求书

1.一种高效液相检测灯盏花成分的方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤一，灯盏花对照品溶液配制；

步骤二，供测试品溶液处理；

步骤三，确定液相色谱条件；

所述步骤一为：

分别精密称取咖啡酸、绿原酸、灯盏乙素、异绿原酸B、异绿原酸A、1 ,5-二咖啡酰奎宁酸、飞鹏酯乙、芹菜素、异绿原酸C和野黄芩素这10种成分的标准品10mg于10mL容量瓶中，用浓度70%甲醇溶解稀释至刻度，作为标准品储备液，分别量取所述10种成分的标准品储备液各1mL于10mL容量瓶混合，并用浓度70%甲醇稀释至刻度，摇匀，得到0 .1mg/mL的对照品溶液；采用0.45μm有机微孔滤膜过滤于液相进样瓶，进样；

所述步骤二为：

采摘灯盏花叶片，干燥箱烘干或自然风干，磨碎叶片，精密称取灯盏花粉末0.500g于100mL锥形瓶中，精密加入浓度70%甲醇50mL，浸泡过夜，于功率250W和频率40kHz超声下提取30分钟，用70%甲醇补足减失的体积，摇匀，转移溶液至离心管中离心，用1mL注射器取上清液过0.45μm有机微孔滤膜过滤于液相进样瓶，进样；

所述步骤三为：

以十八烷基硅烷键合胶为填充剂，选择色谱柱产品参数：未加保护柱EC-C18 2.7μm的色谱柱，以0.2%磷酸+5%乙腈为流动相A相，0.2%磷酸+40%甲醇+40%乙腈为流动相B相，梯度洗脱，用液相色谱仪检测步骤二所得供测试品溶液和步骤一所得10种成分的对照品溶液，选择HPLC-VWD按外标法分析所得到的成分含量；设定梯度如下表所示：

设定流速为1 .000 mL/min；

设定检测波长为335nm；

设定柱温为40℃；

设定进样量为5 .00 μL。

2.一种如权利要求1所述的高效液相检测灯盏花成分的方法，在灯盏花栽培育种和药用资源检测中，检测灯盏花中10种成分咖啡酸、绿原酸、灯盏乙素、异绿原酸B、异绿原酸A、1,5-二咖啡酰奎宁酸、飞鹏酯乙、芹菜素、异绿原酸C和野黄芩素的应用。