[发明专利]一种聚唾液酸的检测方法

摘要

本发明公开了一种聚唾液酸的检测方法，该方法直接取微量的聚唾液酸生产菌株培养菌液滴到点样滤纸的样品检测区，经显色液显色后，用醋酸水溶液清洗掉未结合的显色液，直接对比点样滤纸上标准品的颜色，找出标品对照区中与样品颜色深浅接近点位，该点位对应的聚唾液酸标准品浓度即为培养菌液中聚唾液酸浓度。本发明发明操作简单，发酵过程中随时可以监控产生聚唾液酸的含量，样品采集量很少，仅5μL就可以检测结果，且检测仅需要5分钟，全过程不需要离心，不需要乙醇沉淀过滤，不需要除去杂蛋白，不需要各种仪器，且培养菌液中所含的杂质对检测结果影响不大，聚唾液酸不需要纯化可以直接检测，不受发酵液及其菌体影响。

主权项

一种聚唾液酸的检测方法，其特征在于它由下述步骤组成：(1)将聚唾液酸标准品加入去离子水中，分别配制不同浓度的聚唾液酸标准品溶液，取2～10μL不同浓度的聚唾液酸标准品溶液均匀滴加到点样滤纸的标品对照区的对应浓度点位上，自然晾干或吹风机吹干；(2)取与标准品溶液相同体积的聚唾液酸生产菌株培养菌液，滴加到点样滤纸的样品检测区的点位上，自然晾干或吹风机吹干；(3)将整个点样滤纸浸泡到显色液中，反应20～30秒，取出点样滤纸甩掉显色液，然后将点样滤纸浸泡到洗脱液中，在脱色摇床上洗涤30～60秒倒掉洗脱液，用洗脱液再重复洗涤2～3次，最后用自来水冲洗点样滤纸，自然晾干或用吹风机吹干；(4)将样品检测区与标品对照区进行对比，找出标品对照区中与样品颜色深浅接近点位，该点位对应的聚唾液酸标准品浓度即为培养菌液中聚唾液酸浓度；上述的显色液是溶解有阿尔新蓝的醋酸水溶液，洗脱液是质量分数为8％～15％的醋酸水溶液。