[发明专利]一种链霉菌发酵产物天赐霉素-A及其衍生物的分离纯化工艺

摘要

本发明公开了一种链霉菌发酵产物天赐霉素‑A及其衍生物的分离纯化工艺，所述链霉菌为Streptomyces sp.CB03234‑S，已于2017年9月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017538；分离纯化工艺包括以下步骤：1)CB03234‑S发酵过程中树脂的添加及其洗脱条件的优化；2)通过聚酰胺填料初步分离纯化含有TNM‑A的发酵粗提物；3)通过反相C18填料进行TNM‑A的中压制备纯化。本发明通过在发酵过程中添加适量的树脂，不仅提高了TNM‑A的产量，更有效地简化了其后续的分离纯化步骤，从中节省了萃取所需的大量有机溶剂，随后通过不同填料的两步纯化，可以获得纯度超过90％的TNM‑A，回收率接近40％，上述分离纯化工艺的建立极大地降低了TNM‑A的分离纯化成本。

主权项

1.一种链霉菌发酵产物天赐霉素‑A及其衍生物的分离纯化工艺，其特征在于，所述链霉菌为Streptomyces sp.CB03234‑S，已于2017年9月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017538；所述天赐霉素‑A的结构式为：所述分离纯化工艺包括以下步骤：(1)在链霉菌的发酵过程中添加有树脂，发酵完成后，将链霉菌发酵产物过滤，收集发酵液中的树脂，并用纯水清洗去除附着在树脂上的菌体和其它杂质，再冻藏结冰后通过冷冻干燥去除水分，得到吸附有目标产物的树脂；(2)用甲醇和乙酸乙酯的混合液对吸附有目标产物的树脂进行多次超声洗脱，合并所有洗脱液，浓缩得到粗提浸膏；用水重新溶解粗提浸膏后，再用乙酸乙酯萃取，将萃取得到的萃取液与聚酰胺干粉混合，浓缩至粉末状；再用聚酰胺柱进行纯化，其中，用甲醇水溶液对聚酰胺柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩得到初纯品；(3)再用AQ‑C18中压制备柱对初纯品进行纯化，得到目标产物纯品。