[发明专利]一种链霉菌发酵产物天赐霉素-A及其衍生物的分离纯化工艺

权利要求书

1.一种链霉菌发酵产物天赐霉素-A的分离纯化工艺，其特征在于，所述天赐霉素-A的结构式为：

所述分离纯化工艺包括以下步骤：

(1)在链霉菌的发酵过程中添加有树脂，发酵完成后，将链霉菌发酵产物过滤，收集发酵液中的树脂，并用纯水清洗去除附着在树脂上的菌体和其它杂质，再冻藏结冰后通过冷冻干燥去除水分，得到吸附有目标产物的树脂；

所述链霉菌为Streptomyces sp.CB03234-S，已于2017年9月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017538；

(2)用甲醇和乙酸乙酯的混合液对吸附有目标产物的树脂进行多次超声洗脱，合并所有洗脱液，浓缩得到粗提浸膏；用水重新溶解粗提浸膏后，再用乙酸乙酯萃取，将萃取得到的萃取液与聚酰胺干粉混合，浓缩至粉末状；再用聚酰胺柱进行纯化，其中，用甲醇水溶液对聚酰胺柱进行洗脱，收集洗脱液，浓缩得到初纯品；

(3)再用AQ-C18中压制备柱对初纯品进行纯化，得到目标产物纯品；

所述步骤(2)中，用体积分数55-80％的甲醇水溶液进行梯度洗脱，在洗脱过程中，洗脱液中甲醇的浓度逐渐提高，收集体积分数65-70％的甲醇水溶液洗脱出的溶液，浓缩后用乙酸乙酯萃取直至萃取相无色，萃取相再次浓缩干燥后得到初纯品；

所述步骤(3)中，AQ-C18中压制备柱的纯化条件如下：流速为5.0mL/min，紫外检测器波长为540nm，洗脱液为体积分数50-100％的甲醇水溶液，逐渐提高洗脱液中甲醇的含量进行梯度洗脱，将质量分数为65-70％的甲醇洗脱液收集的组分合并后进行浓缩，得到纯度超过90％的目标产物纯品。

2.如权利要求1所述的分离纯化工艺，其特征在于，所述步骤(2)中甲醇和乙酸乙酯的混合液中，甲醇和乙酸乙酯的体积比为2:1-1:3。

3.如权利要求1所述的分离纯化工艺，其特征在于，所步骤(3)中，目标产物纯品的纯度为90％以上。