[发明专利]一种猪瘟活疫苗效力的检测方法在审

专利信息
申请号: 201711200120.6 申请日: 2017-11-27
公开(公告)号: CN108220477A 公开(公告)日: 2018-06-29
发明(设计)人: 肖华春;李文春;皇培刚;曹灿花;吴艳琴;田贵云;李斌;王成业 申请(专利权)人: 云南生物制药有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/686
代理公司: 昆明润勤同创知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 53205 代理人: 付石健
地址: 650000 云南省昆*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明公开了一种猪瘟活疫苗效力的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:将培养好的ST细胞进行RNA提取,PCR反应,电泳和凝胶成像。本发明的优点是,检验周期为4天,检验不需要动物。在实验室即可完成,工作量小,效率高,影响因素可控,准确性高,操作简单,重现性高,检验成本仅为原方法的三分之一左右,具有很高的应用前景。
搜索关键词: 猪瘟活疫苗 检验 电泳 凝胶成像 影响因素 重现性 检测 可控 工作量 应用
【主权项】:
1.一种猪瘟活疫苗效力的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:将培养好的ST细胞进行RNA提取,PCR反应,电泳和凝胶成像;所述PCR反应的体系为按每50ul反应物计,含有15ul双酶一管式RT‑PCR2倍缓冲稀释液、2ul猪瘟病毒专性引物对、3ul样品RNA、28ul超纯水和2ul逆转录酶与耐热酶的混合物;所述PCR反应的设置为:温度 时间 60℃ 30min 94℃ 2min 94℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 30s 72℃ 5min 4℃ 5min 
所述电泳是将经所述PCR反应所得的反应物加入上样缓冲液,再加入至琼脂凝胶中,在V:130v、I:400mA、T:25min由负极至正极的条件下开始电泳。
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