[发明专利]一种简单快速的水稻DNA提取方法在审

专利信息
申请号: 201711169494.6 申请日: 2018-01-12
公开(公告)号: CN107828781A 公开(公告)日: 2018-03-23
发明(设计)人: 何弯弯;王健康;丁成伟;郭荣良;吴玉玲;徐家安;王友霜;胡婷婷;赵轶鹏 申请(专利权)人: 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心)
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 徐州市三联专利事务所32220 代理人: 周爱芳
地址: 221000 江苏省徐*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明提供了一种水稻DNA提取方法,包括将水稻叶片剪碎置于2ml离心管中,加入提取液,在65℃烘箱中处理30min左右,离心后将上清液置于盛有异丙醇的96孔板中,静置30min左右,离心后所得白色固体即为DNA。与传统DNA提取技术相比,本发明操作简单、快捷,所用试剂少,成本低,无需酚、氯仿抽提,环境比较友好,不需要液氮或者冷冻样品。本发明提取的DNA具有产率高、质量好,PCR扩增成功率高、成本低、通用性好、分子稳定性强等特点。
搜索关键词: 一种 简单 快速 水稻 dna 提取 方法
【主权项】:
一种简单快速的水稻DNA提取方法,其特征在于:按如下步骤进行步骤1)取5‑10mg水稻叶片,将其尽量剪碎,长度小于1cm,置于2ml离心管中;步骤2)向离心管中加入200‑500µl提取液,在烘箱中65℃处理30min,在此期间每隔10‑20min轻摇一次;步骤3)再将上述离心管在10000rpm条件下,离心5min,并将上清液转入装有异丙醇的96孔板中,转移至‑20℃冰箱或室温静置30min‑1h;步骤4)在6000rpm离心3min,弃上清液;用排枪加入70%的无水乙醇200µl清洗,吹干;步骤5)加入灭菌的双蒸水或TE溶液溶解,即可提取DNA;所述提取液为:12.114g三羟甲基氨基甲烷,3.722g乙二胺四乙酸二钠,74.55g氯化钾,加水定容至1L,pH=8.0。
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