[发明专利]一种利用玻璃拉针挑取多能干细胞克隆的方法

摘要

本发明提供了一种无需用到解剖显微镜，只需在普通的倒置显微镜配合玻璃拉针和枪头即可进行多能干细胞克隆挑取的方法。该方法主要包括如下步骤：挑取多能干细胞克隆的玻璃拉针的制备；挑取多能干细胞克隆前的细胞换液和对克隆位置的标记；利用玻璃拉针从其他细胞和培养板中剥离出多能干细胞和利用200μL枪头吸取多能干细胞克隆。该方法简便易行，对于普通实验室可以节省购买解剖显微镜的成本。同时本发明提供的方法也适用于胚胎干细胞克隆的挑取和去除干细胞中分化的或者不纯的细胞，能作为一种纯化干细胞株，建立均一的、高纯度和高品质的干细胞株的方法。

主权项

1.一种利用玻璃拉针的挑取多能干细胞克隆的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤:(1)挑取克隆所用的玻璃拉针的制备：将玻璃巴氏吸管一端置于酒精灯上灼烧后拉伸至末端断裂，将末端烧结封闭，并将玻璃巴氏吸管加热向下弯曲至30～90°，制备成玻璃拉针；(2)挑取多能干细胞克隆前的准备：在挑取克隆前需要先更换细胞的培养基，并对所需挑取的克隆在显微镜下进行拍照和标记；(3)进行多能干细胞单克隆挑取时，首先利用步骤(1)中制备的玻璃拉针在显微镜下剥离干细胞克隆，使整个克隆脱离培养板底部，然后再利用200μL的枪头吸取克隆进行消化和传代。