[发明专利]血清miRNAs生物标志物及其应用

摘要

本发明属于生物医药领域，具体涉及血清miRNAs生物标志物及其筛选方法和应用，其筛选方法包括以下步骤：1)从血清中提取包括miRNAs在内的总RNA；2)比较慢乙肝和慢乙肝后肝硬化患者的miRNAs表达谱，找出肝硬化患者血清中异常表达的miRNAs；3)用实时定量RT‑PCR方法，经小样本初筛及扩大样本验证，筛选可用作肝硬化标志物的miRNAs；4)ROC曲线进行相关分析。本发明筛选的慢乙肝后肝硬化辅助诊断标志物为miR‑27a，在肝硬化患者血清中呈高表达，并影响肝星状细胞的增殖，具有潜在诊断和治疗价值，且样本易得、收集简便、无创，具有重要的学术意义和广阔的应用前景。

主权项

血清miRNAs生物标志物的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：1)采集健康者、慢乙肝患者和慢乙肝后肝硬化患者的血清，提取总RNA；2)初筛：检测慢乙肝患者和慢乙肝后肝硬化患者临床血清标本中miRNAs表达，比较慢乙肝患者和慢乙肝后肝硬化患者的miRNAs表达谱，筛选肝硬化患者血清中异常表达的miRNAs作为候选；3)复筛：采用实时定量RT‑PCR技术，对步骤2)中候选miRNAs进行小样本和/或扩大样本筛选，筛选和确定用作肝硬化标志物的miRNAs；4)评价：采用ROC曲线法对步骤3)筛选的肝硬化标志物miRNAs进行临床价值评价。