[发明专利]人类EGFR基因T790M突变检测试剂盒及其检测方法在审

专利信息
申请号: 201710950264.7 申请日: 2017-10-13
公开(公告)号: CN107502673A 公开(公告)日: 2017-12-22
发明(设计)人: 卓萍萍;廖婷婷 申请(专利权)人: 福建医科大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 福州元创专利商标代理有限公司35100 代理人: 蔡学俊
地址: 350108 福建省福州市闽*** 国省代码: 福建;35
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摘要: 发明提供人类EGFR基因T790M突变检测试剂盒及其检测方法。EGFR基因突变是非小细胞肺癌等癌症靶向药物选用的重要依据,其中T790M突变检测对于耐药与否的判断至关重要。本发明基于耐热DNA聚合酶、耐热DNA连接酶和针对EGFR基因的T790M突变的连接引物,极大抑制了样品中的野生型EGFR基因的扩增,使得T790M突变片段的比例高于50%,从而保证了限制性内切酶对于杂合基因片段体系的准确识别。本发明方法及试剂盒可以有效检测低至1%的EGFR基因T790M突变,准确率极高,操作简便且检测费用低廉。
搜索关键词: 人类 egfr 基因 t790m 突变 检测 试剂盒 及其 方法
【主权项】:
人类EGFR基因T790M突变检测试剂盒,其特征在于:试剂盒包含SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2的扩增引物,SEQ ID NO.3和 SEQ ID NO.4的连接引物,rTaq DNA聚合酶及其配套的10× PCR Buffer和dNTP Mixture,Taq DNA连接酶及其配套的10×Taq DNA连接酶缓冲液,BstUI限制性内切酶及其配套的10×BstUI酶缓冲液;其中,SEQ ID NO.3的5’端的第一个核苷酸为磷酸化修饰,SEQ ID NO.4的5’端和3’端的第一个核苷酸均为磷酸化修饰。
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