[发明专利]均环肽Cyclo-(Cys)6

摘要

本发明公开了一种均环肽Cyclo‑(Cys)6的制备方法，包括：(1)树脂与带保护基的半胱氨酸进行反应连接，形成连接有一个半胱氨酸的树脂；(2)树脂连接的一个半胱氨酸与带保护基的半胱氨基酸连续缩合，形成连接有直链肽的树脂；(3)直链肽从树脂上切割下来，首尾相连环化，得到环肽粗品；(4)环肽的纯化与保存。本发明所制备的Cyclo‑(Cys)6为由单一氨基酸所形成的均环肽结构，具有与冠醚类化合物极其类似的结构，分子在结构上具有很好的规整性及多向对称性，更易于自组装成为离子通道或者纳米管，从而作为药物载体、膜通道、分子器件等；侧链上含有多个巯基官能团，使得其具有更好的反应活性，可作为高效点击反应的前体试剂；同时，工艺合理、操作简捷，且合成效率较高。

主权项

一种均环肽Cyclo‑(Cys)6的制备方法，其特征在于，包括：步骤一、将树脂溶胀后除去溶剂，取氨基带芴甲氧羰酰基保护基和侧链巯基带三苯甲基保护基的半胱氨酸、N,N‑二异丙基乙胺DIEA加入树脂中，再加入二甲基甲酰胺DMF使之溶解，室温下震荡反应30～60min；然后加入甲醇孵育20min；用DMF和甲醇溶剂反复清洗树脂并抽掉溶剂，第一个氨基酸连接在树脂上；去掉溶剂后，加入裂解液，去除半胱氨酸氨基上的保护基芴甲氧羰酰基；取样检测确保氨基酸已经连接在树脂上，且已裸露出不带保护的氨基；步骤二、在步骤一得到的产物中再次加入氨基带芴甲氧羰酰基保护基和侧链巯基带三苯甲基保护基的半胱氨酸，同时加入缩合试剂，与树脂上氨基酸进行缩合，然后去掉溶剂后，加入裂解液，去除半胱氨酸氨基上的保护基芴甲氧羰酰基，取样检测后，再重复四次上述操作，直至半胱氨酸偶联完全，脱除最后一个半胱氨酸氨基上的保护基芴甲氧羰酰；步骤三、在步骤二得到的产物中加入切割液，将缩合好的直链肽从树脂上切割下来；用旋转蒸发仪除去切割液，得到带保护的肽段；用二氯甲烷将带保护的肽段溶解，加入环化试剂，完成环化反应；采用旋转蒸发仪除去溶剂，加入裂解液，脱除巯基上的三苯甲基保护基；用冰乙醚沉降离心，再用乙醚洗涤沉降物3次，然后常温挥发至干，得到环肽粗品；步骤四、将得到的环肽粗品用少量乙腈溶解，在高效液相色谱仪上梯度淋洗纯化，冻干即可得到白色粉末状的环肽纯品，密封包装，‑20℃保存。