[发明专利]聚离子液体磁性纳米复合物及其对痕量循环肿瘤细胞特异性富集和检测的应用

摘要

本发明公开了一种聚离子液体磁性纳米复合物及其对痕量循环肿瘤细胞特异性富集和检测的应用，本发明提供了一种具有高灵敏度，高特异和高准确度的磁性纳米生物探针，并用于对CTCs的分离和富集中。磁珠表面丰富的羧基官能团，能够通过与抗体的氨基化学键合，提高与EpCAM抗体偶联的效率，结合磁珠本身较大的比表面积以及良好的分散性，显著提高了对CTCs的富集效率。同时，聚离子液体本身优良的生物相容性，也显著降低了对细胞的毒性，从而提高了富集后细胞的成活率。

主权项

1.一种能够对痕量循环肿瘤细胞特异性富集和检测的聚离子液体磁性纳米复合物，其特征在于它由如下步骤制备而成：（A）羧基功能化离子液体单体的合成：将溴乙酸和1‑乙烯基咪唑在甲苯中于50～60 ℃下反应，得到羧基功能化离子液体单体；（B）Fe₃O₄/SH磁性纳米球的合成：将Fe₃O₄磁性纳米球分散在溶剂中，加入3‑巯基丙基三甲氧基硅烷进行反应，得到Fe₃O₄/SH磁性纳米球；（C）聚离子液体功能化磁珠的合成：将Fe₃O₄/SH磁性纳米球与羧基功能化离子液体单体和交联剂在乙醇中混合后，加入引发剂于60～80℃进行聚合反应，得到聚离子液体功能化磁珠MNs；所述交联剂的合成方法为：将1‑乙烯基咪唑和1,4‑二溴丁烷在甲醇中混合后，在50～60 ℃搅拌反应，反应后将反应混合物冷却，然后加入乙醚中，将所得的半透明溶液冷置后分离产物，洗涤干燥；（D）聚离子液体磁性纳米复合物的制备：将MNs分散于含EDC和NHS的PBS溶液中进行活化，然后通过磁场分离活化的MNs，将其重新悬浮于PBS溶液中，加入EpCAM抗体进行孵育，多次洗涤，得到聚离子液体磁性纳米复合物IMNs。