[发明专利]一种灰毛豆内生真菌发酵制备(R)-4-苄基-2-噁唑烷酮化合物的方法有效

专利信息
申请号: 201710580901.6 申请日: 2017-07-17
公开(公告)号: CN107354182B 公开(公告)日: 2018-05-25
发明(设计)人: 丁文兵;李叶;李有志;刘胜 申请(专利权)人: 湖南农业大学
主分类号: C12P17/14 分类号: C12P17/14;C07D263/22;C12R1/645
代理公司: 长沙正奇专利事务所有限责任公司 43113 代理人: 何为;袁颖华
地址: 410128 湖*** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 一种灰毛豆内生真菌发酵制备(R)‑4‑苄基‑2‑噁唑烷酮化合物的方法,是以保藏号为CCTCC NO:M 2017408的灰毛豆内生真菌淡紫拟青霉菌(Purpureocilliumlilacinum)TPL04作为发酵菌株获得发酵液,将发酵液分离纯化得到化学合成中常用的多用途的不对称合成手性助剂(R)‑4‑苄基‑2‑噁唑烷酮化合物。本方法所得目标化合物纯度高、产率可观,并且分离纯化过程简单、所用试剂填料经济,为(R)‑4‑苄基‑2‑噁唑烷酮的生产制备开创了新途径,并提供了菌种来源。
搜索关键词: 苄基 内生真菌 毛豆 制备 发酵 淡紫拟青霉菌 不对称合成 发酵液分离 目标化合物 保藏 发酵菌株 分离纯化 化学合成 菌种来源 试剂填料 手性助剂 发酵液 新途径 产率 生产
【主权项】:
1.一种灰毛豆内生真菌发酵制备(R)-4-苄基-2-噁唑烷酮化合物的方法,其特征在于,该方法步骤如下:A、以保藏号为CCTCC NO:M 2017408的灰毛豆内生真菌淡紫拟青霉菌(Purpureocilliumlilacinum)TPL04作为发酵菌株,制备该菌株的发酵液;其中,该发酵液是将斜面保藏的灰毛豆内生真菌淡紫拟青霉菌TPL04进行活化,再接种至PDB液体培养基中进行摇瓶发酵培养,过滤,取滤液得到;发酵培养条件为:接种量5%~10%、摇瓶转速100~300r/min,温度15~28℃、时间1~30天;B、按体积比1:1采用萃取溶剂萃取发酵液3次,合并萃取液,减压浓缩,得浸膏;C、将浸膏上硅胶柱进行层析,以石油醚/丙酮作为洗脱剂,按体积比9:1、8:2、7:3进行梯度洗脱,收集石油醚:丙酮的体积比为7:3的梯度洗脱下来的流份;将此流份再上葡聚糖凝胶柱进行层析,以纯甲醇进行洗脱,收集并合并紫外和碘氧化均能显色的组份;将该组分进一步用高效液相色谱进行纯化,即得白色固体状化合物(R)-4-苄基-2-噁唑烷酮。
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