[发明专利]一种硬膜生物补片及其制备方法

摘要

本发明公开了一种硬膜生物补片及其制备方法。该硬膜生物补片采用小肠粘膜下层组织为原料，系统的去除免疫原性物质工艺，包括使用乙醇处理去除脂质、使用胰蛋白酶和碱溶液处理脱细胞，使用DNA酶处理去除DNA，使用α‑半乳糖苷酶处理去除α‑Gal抗原等步骤，既能有效去除免疫原性物质又不会破坏细胞外基质正常结构。临床上应用于硬膜缺损修补时，可有效防止脑脊液渗漏，可引导组织长入，组织生长速度跟补片降解速度匹配，并且免疫排斥反应低，生物相容性好。

主权项

本发明公开了一种硬膜生物补片的制备方法，其特征在于包括以下操作步骤：（1）预处理取新鲜屠宰动物的猪小肠组织清洗洁净，置于0.01%~0.5%醋酸溶液浸泡10~120min，去腥，使用物理刮除法除去猪小肠空肠的粘膜层、肌层、浆膜层、淋巴结，分离出粘膜下层，切成片段，使用纯化水冲洗至少 3 遍；（2）消毒使用浓度为0.5～1.5％的过氧乙酸和浓度为15～25％的乙醇的混合水溶液，超声条件下，室温浸泡30~120min，进行消毒，之后使用纯化水超声清洗至少3遍；（3）脱脂使用浓度为90‑100%的乙醇，超声条件下，常温浸泡0.5‑12h，之后使用纯化水超声清洗至少3遍；（4）脱细胞、去DNA和去α‑Gal抗原使用含0.01～0.10％胰蛋白酶和含0.01～0.05%EDTA的混合水溶液，超声条件下，于36±2℃条件下浸泡15‑40min，之后使用PBS超声清洗至少3遍；使用含0.05～10U/ml DNA 酶的水溶液，超声条件下，于36±2℃条件下浸泡15‑40min，之后使用PBS漂超声清洗至少3遍；使用含0.05～10U/mlα‑半乳糖苷酶的水溶液，超声条件下，于20‑37℃条件下浸泡15‑40min，之后使用PBS超声清洗至少3遍；使用浓度为5‑ 40mM 的NaOH水溶液，超声条件下，常温浸泡20‑60min，之后使用PBS超声清洗直至中性；（5）冻干、灭菌将SIS片材3～12层叠加，固定于模具上，冷冻干燥后，裁剪成临床使用所需规格，采用PET包装袋进行包装，最后进行辐照灭菌。