[发明专利]用于real-time RPA快速检测和区分PRV野毒和疫苗毒的核酸及方法有效
申请号: | 201710556795.8 | 申请日: | 2017-07-10 |
公开(公告)号: | CN107236825B | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 王建昌;刘立兵;陈晨;孙晓霞;王金凤;马付坤;闫慧;张静依 | 申请(专利权)人: | 河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心;北京佰鸥创投生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京智为时代知识产权代理事务所(普通合伙) 11498 | 代理人: | 王加岭;杨静 |
地址: | 050051 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 本发明属于生物技术领域,具体公开了一种用于real‑time RPA快速鉴别检测PRV野毒和疫苗毒的核酸及方法。根据PRV基因组中gB和gE基因的保守区域设计特异性RPA引物和exo探针。提供的real‑time RPA快速鉴别检测PRV野毒和疫苗毒的方法能够在39℃下20min内,在一个反应体系中实现对PRV野毒和疫苗毒的特异性检测和区分,而与其他常见的猪病毒没有交叉反应,其反应快速、操作简便、结果可靠,非常适用于兽医诊断实验室和养殖场现场的PRV检测,尤其是在资源匮乏的边远地区的养殖场的现场检测。 | ||
搜索关键词: | 用于 real time rpa 快速 检测 区分 prv 疫苗 核酸 方法 | ||
【主权项】:
一组用于real‑time RPA快速检测PRV病毒的核酸,其特征在于,包括用于检测PRV的上游引物1、下游引物1和exo探针1;其中,所述上游引物1的序列如SEQ ID No.1所示,所述下游引物1的序列如SEQ ID No.2所示,所述exo探针1的序列如SEQ ID No.3所示,其中,所述exo探针1的第31位T碱基标记荧光基团,第32位T碱基标记荧光淬灭基团,所述第31位T碱基与所述第32位T碱基之间设有四氢呋喃分子,所述exo探针1的3’端标记有C3、磷酸基团、生物素‑TEG或氨基。
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